[发明专利]一种昆布多糖的提取方法及应用

说明书

本发明公开了一种昆布多糖的提取方法及应用，该方法包括将昆布、水和酶混合进行酶解、醇沉、冻干、纯化等步骤，得到高纯度昆布多糖，并利用该多糖制备了饮片或饮料等产品。本发明的复合酶法反应条件温和，在最适的反应环境下，酶促反应的高效性和专一性使得多糖的释放效率得到了较大的提升，因此复合酶法较热水浸提法、酸浸提法、超声波辅助提取法等有更高的提取率，提升了多糖的活性和溶解性，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明属于食品科学技术领域，特别涉及一种昆布多糖的提取方法及应用。

背景技术

昆布，其食用部分以海带科海带和翅藻科黑昆布的叶状物为主，是生活中常见的可食用大型海藻，具有软坚散结、消肿利水、润下消痰等保健功效。研究发现，昆布的药理作用与它所含有的多糖成分有关。昆布多糖主要有三种类型：褐藻酸盐、褐藻淀粉、褐藻糖胶。通过对昆布多糖的深入研究发现其具有多种生理活性。多糖在抗肿瘤方面一直有较为出色的表现，近年来通过实验发现昆布多糖对于人胃癌NKM-45细胞、卵巢癌SK-OV细胞、宫颈癌HELA细胞、肝癌SMMC-7721细胞，以及小鼠S180肉瘤、B16黑色素瘤细胞等均具有明显的抑制作用。另外，昆布多糖对特异性免疫和非特异性免疫都有很好的调节作用，能够提高机体的免疫力。研究还发现，昆布多糖还具有抗病毒、抗凝血、抗炎、抑菌、抗衰老、抗血管生成、调节酪氨酸激酶活性等多种生物活性。

随着应用开发价值以及市场前景逐渐被重视，昆布多糖的提取分离纯化工艺也日渐完善。昆布多糖的提取方法有很多，目前大量研究与应用的主要有热水浸提法、酸浸提法、酶提法、超声波辅助提取法等。其中，热水提法是最广为人知的方法，因其简单的提取设备、容易上手的操作、不太高的成本而广泛用于工业生产。但是，热水提法提取率没有其他方法高，耗费时间比较久，且较高的提取温度容易导致多糖活性被破坏。相较于热水提法，酸浸提法的提取率有所提高而且耗时也比较短。酸浸提法也有一定的缺点，通过酸浸提法最终得到的多糖分子会有部分降解，且当总糖的浓度增大时，多糖的含量就会有所下降。超声辅助提取法比酸浸提法得到的多糖含量更高，所含的大分子杂质也略有减少，但是过大的超声功率可能对多糖分子产生一定的破坏，导致其生理活性降低。如何高效提取多糖的同时保证多糖较高的活性成为人们关注的热点。

发明内容

发明目的：为了克服现有技术中存在的不足，本发明提供一种昆布多糖的提取方法及应用。

技术方案：为实现上述目的，本发明一种昆布多糖的提取方法，其包括以下步骤，(1)将昆布、水和酶混合，调节pH后混合均匀进行酶解，酶解结束后迅速100℃水浴灭酶10min；(2)减压抽滤，滤液中加入适量无水乙醇，静置24h，析出沉淀；(3)将沉淀物用无水乙醇缓慢冲洗2～3次，然后冻干得到多糖制品。

优选的，所述酶包括木瓜蛋白酶、果胶酶、纤维素酶中的一种或几种。

优选的，按质量分数计，所述木瓜蛋白酶2.5～3.5％、所述果胶酶1.5～2.5％、所述纤维素酶4～6％。

优选的，步骤(1)中，所述调节pH后进行酶解，其为将pH调整为5，在50℃水浴酶解提取3h。

优选的，提取方法中还包括纯化，纯化步骤包括，(1)溶解多糖制品，采用sevage法去除蛋白质；(2)上DEAE阴离子交换柱，用0.1-0.3mol/LNaCl溶液以1mL/min的流速对样液进行洗脱，55℃旋转蒸发浓缩，透析后将透析液进行冻干处理后得到初步纯化产品；(3)溶解初步纯化产品，上SepHadex G-100葡聚糖凝胶柱，用水以0.5mL/min的流速对样液进行洗脱，后55℃旋转蒸发浓缩，最后将透析液真空冷冻干燥，得到纯化产品。

作为本发明的另一方面，本发明提供一种昆布多糖，其为黄色、黄白色或白色絮状固体。

优选的，所述昆布多糖对人乳腺癌细胞MCF-7的半抑制浓度小于512.5μg/mL。

优选的，所述昆布多糖对人肺癌细胞A549的半抑制浓度小于609.7μg/mL。