[发明专利]一种肝脏模型及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种培养基，其特征在于，所述培养基包括第一培养液，以第一培养液总体积为基础计，包括以下成分：

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，还包括下列特征中的一项或多项：

1)所述培养基还包括第二培养液，以第二培养液总体积为基础计，包括以下成分：

2)所述培养基还包括第三培养液，以第三培养液总体积为基础计，包括以下成分：

3)所述培养基还包括第四培养液，以第四培养液总体积为基础计，包括以下成分：

4)所述培养基还包括第五培养液，以第五培养液总体积为基础计，包括以下成分：

5)所述培养基还包括第六培养液，所述第六培养液以第六培养液总体积为基础计，包括以下成分：

3.根据权利要求1-2任一所述的培养基，其特征在于，所述基础培养液选自MEM、DMEM、DMEM/F12、RPMI1640或F12中的一种或几种。

4.权利要求1所述的培养基在体外诱导胚胎干细胞系分化为类肝细胞中的用途。

5.一种体外诱导胚胎干细胞系分化为类肝细胞的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：依次用所述第一培养液、第二培养液、第三培养液、第四培养液培养胚胎干细胞系。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，将培养的胚胎干细胞系中的培养液换成第一培养液时，记为第0天，所述方法还包括以下特征中的一项或几项：

1)在第2～3天时换用第二培养液；

2)在第7～9天时换用第三培养液；

3)在第13～15天时换用第四培养液，直至第19～21天时诱导结束。

7.一种肝脏模型，其特征在于，所述肝脏模型为通过将权利要求5所述的方法得到的类肝细胞经垂直旋转培养装置自组装获得。

8.权利要求7所述的肝脏模型在阐明制备生物人工肝、肝脏疾病机制研究、肝脏疾病药物的开发、筛选、药理毒理学评价、或化合物肝脏毒性测试中的用途。

9.一种肝脏模型的制备方法，其特征在于，所述方法包括将权利要求5所述的方法得到的类肝细胞在垂直旋转培养装置中培养即获得肝脏模型。

10.根据要求9所述的制备方法，其特征在于，还包括以下特征中的一项或几项：

1)垂直旋转培养时细胞密度为10⁵～10⁶个/ml；

2)垂直旋转培养时的转速为20～60转/分钟；

3)培养的时间为96～144小时。