[发明专利]大鼠子宫内膜深度损伤模型的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种大鼠子宫内膜深度损伤模型的构建方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

步骤1、选用性成熟为交配雌性SD大鼠，每天进行大鼠阴道细胞涂片，确定动情周期，选取动情期大鼠并分为模型组和假手术组；

步骤2、对模型组中的大鼠麻醉后，从尿道口上端3cm处正中纵向切开皮肤2～3cm，逐层分离进入腹腔，找到子宫并采用刮宫器进行刮宫，其中以相同的力度和搔刮次数分别对各个大鼠左侧子宫进行损伤，然后再用注射器注入10mg/L脂多糖溶液，保持宫腔处于充盈状态，30min后抽出，对所有大鼠的右侧子宫剪开后缝合，不予搔刮；对假手术组中的大鼠的两侧子宫均只做手术切口后缝合，不做其它任何处理；

步骤3、步骤2完成后，经过两个动情周期，对各组大鼠取子宫组织进行4％多聚甲醛固定，经石蜡切片包埋，通过HE染色、Masson染色、免疫组织化学染色检测子宫内膜变化情况。

2.根据权利要求1所述的一种大鼠子宫内膜深度损伤模型的构建方法，其特征在于，步骤1中选用的SD大鼠均为8-12周龄，体重220g-240g。

3.根据权利要求2所述的一种大鼠子宫内膜深度损伤模型的构建方法，其特征在于，步骤1中进行大鼠阴道细胞涂片的时间为每天上午8-10点。

4.根据权利要求3所述的一种大鼠子宫内膜深度损伤模型的构建方法，其特征在于，步骤2中大鼠麻醉前需禁食12小时，且麻醉具体为按照3mL/kg剂量腹腔注射10％水合氯醛麻醉，然后仰卧位固定在动物解剖台上，腹部经常规消毒后进行皮肤切开。

5.根据权利要求4损伤的一种大鼠子宫内膜深度损伤模型的构建方法，其特征在于，采用刮宫器进行刮宫具体为在子宫远端剪一直径0.3cm小口后，采用针头处掰弯成90°角的16G注射针头探入剪开的小口内环绕搔刮子宫内膜，刮除中上段子宫内膜，搔刮长度自切开小口起1-1.5cm，力度以不穿透子宫为准，直至挂出大量内膜且自觉宫腔粗糙，然后缝合子宫切口。

6.根据权利要求5所述的一种大鼠子宫内膜深度损伤模型的构建方法，其特征在于，步骤2中注射脂多糖溶液具体为用血管钳夹住左侧子宫的近阴道端和近输卵管端，用1ml注射器针头于子宫下段进入宫腔，并保持与子宫纵轴平行，缓慢注入10mg/L脂多糖溶液0.3-0.5ml，保持宫腔处于充盈状态，无菌纱布保护子宫周围组织，30min后抽出脂多糖溶液，松开血管钳行子宫缺血再灌注。

7.根据权利要求6所述的一种大鼠子宫内膜深度损伤模型的构建方法，其特征在于，步骤3中取得子宫组织均为子宫中上段1-1.5cm长度的组织块。

8.根据权利要求7所述的一种大鼠子宫内膜深度损伤模型的构建方法，其特征在于，免疫组织化学染色检测具体为对I型胶原蛋白、角蛋白、血小板内皮细胞粘附分子-1和波形蛋白的染色检测。

9.一种大鼠子宫内膜深度损伤模型，其特征在于，所述一种大鼠子宫内膜深度损伤模型采用如权利要求1-8中任意一项所述的方法构建得到。