[发明专利]用于对目标抗体进行检测的多肽的筛选方法及其筛选的多肽的应用

说明书

本发明提供了一种用于对目标抗体进行检测的多肽的筛选方法及其筛选的多肽的应用。该筛选方法包括：利用多肽芯片技术对带荧光标记的抗原进行检测，得到与抗原具有特异性结合潜能的第一肽段集；将第一肽段集中的多肽与抗原的受体蛋白进行氨基酸序列比对，得到第二肽段集；利用含目标抗体的阳性样本和不含目标抗体的阴性样本，对第二肽段集中的多肽进行验证，从而筛选出能够检测目标抗体的多肽。利用多肽芯片技术能够在短时间内获得大量有抗原特异性结合潜能的多肽，进而通过氨基酸序列比对及已知样本验证，即可获得检测目标抗体的多肽。该方法成本低、通量高、候选多肽结合率高、准确率高等特点。

技术领域

本发明涉及多肽芯片技术领域，具体而言，涉及一种用于对目标抗体进行检测的多肽的筛选方法及其筛选的多肽的应用。

背景技术

现有技术中，为了获得能对目标抗体进行检测的肽段，常规采用的方法大致如下：通过计算机软件预测目标抗体的结合位点，并根据该结合位点设计候选肽段并进行化学合成，然后对合成出的候选肽段进行标记，使标记后的候选肽段与目标抗体接触，然后检测标记的信号，进而根据信号的强弱判断候选肽段与目标抗体的结合能力，最后根据判断结果确定是否成功获得了能对目标抗体的进行检测的肽段。但是该方法的成功依赖于计算机软件的预测结合位点的能力，对基于预测出的结合位点设计候选肽段的操作人员的专业技术能力要求高，还需分别合成各种候选肽段进行实验来验证。

为此，仍需要对现有的检测目标抗体的多肽的筛选方法进行改进，以提供一种高效高通量的多肽的筛选方法。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种用于对目标抗体进行检测的多肽的筛选方法及其筛选的多肽的应用，为开发新的检测目标抗体的多肽提供基础。

为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种用于对目标抗体进行检测的多肽的筛选方法，该筛选方法包括：利用多肽芯片技术对带荧光标记的抗原进行检测，得到与抗原具有特异性结合潜能的第一肽段集；将第一肽段集中的多肽与抗原的受体蛋白进行氨基酸序列比对，得到第二肽段集；利用含目标抗体的阳性样本和不含目标抗体的阴性样本，对第二肽段集中的多肽进行验证，从而筛选出能够检测目标抗体的多肽。

进一步地，利用多肽芯片技术对带荧光标记的抗原进行检测，得到与抗原具有特异性结合潜能的第一肽段集包括：对抗原进行荧光标记；利用多肽芯片技术对带有荧光标记的抗原进行检测，得到与抗原具有不同结合信号强度的多肽集合，记为第一肽段集。

进一步地，将带有荧光标记的抗原进行多个浓度梯度稀释，得到多个不同浓度的带有荧光标记的抗原；利用多肽芯片技术对多个不同浓度的带有荧光标记的抗原进行检测，从而得到不同浓度下与抗原具有不同结合信号强度的多肽集合，记为第一肽段集。

进一步地，利用多肽芯片技术对带有荧光标记的抗原进行检测，得到与抗原具有特异性结合潜能的第一肽段集包括：将多肽芯片与带有荧光标记的抗原进行孵育，得到与抗原具有不同结合信号强度的多肽集合；按照结合信号强度对多肽集合中的多肽进行排序；选取排名靠前的第一预定数量的多肽作为第一肽段集。

进一步地，按照结合信号强度对多肽集合中的多肽进行排序包括：计算每个浓度下，与抗原具有不同结合信号强度的多肽集合中的每种多肽序列对应特征的信号强度值，并按照信号强度值进行排序；优选地，计算每个浓度下，与抗原具有不同结合信号强度的多肽集合中的每种多肽序列对应特征的信号强度的均值或中位值，并按照均值或中位值进行排序；更优选地，对每个浓度下，与抗原具有不同结合信号强度的多肽集合中的每种多肽序列对应特征的信号强度值进行log10转换，并按照转换之后的log10值的均值或中位值进行排序。