[发明专利]LOC663462基因在防治害虫中的应用

说明书

本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及LOC663462基因在害虫防治中的应用。本发明以LOC663462基因为靶标，设计dsRNA并注射入昆虫体内，观察对昆虫生殖和发育的影响，发现注射LOC663462 dsRNA后，昆虫体型变小，体长和体宽都有一定程度的减小；自交后产卵数和孵化率明显降低，并且LOC663462基因是通过影响卵黄原蛋白受体VgR的表达，影响VgR识别卵黄原蛋白，从而影响卵黄原蛋白进入卵子内参与卵子的成熟过程，这在影响昆虫生殖尤其是害虫生殖方面有重要的作用。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及LOC663462基因在害虫防治中的应用。

背景技术

赤拟谷盗(Tribolium castaneum)属鞘翅目拟步甲科，拟谷盗属，分布于世界热带与较温暖地区。赤拟谷盗食性复杂，多生活在干燥的环境中，具有寿命长、繁殖快、适应性广等特点，是一种重要的世界性储粮害虫。除了直接为害外，赤拟谷盗成虫的体表上的臭腺还能分泌含有致癌物质苯醌的臭液，使被害物发生腥霉臭气，导致变色发臭不能食用。

赤拟谷盗是公认的鞘翅目昆虫中易于实验操作的代表性昆虫，也是一种在遗传进化和发育研究方面易于驾驭的模式昆虫。其完整的基因组测序表明，赤拟谷盗基因组包括大约2亿个核苷酸，基因(或蛋白)数量大约有16000个。该基因组的全面分析，将对发现新的药品和抗生素提供帮助，为抗性种类、杀虫剂药效及生物药剂控制农业昆虫和病菌等提供帮助，最终为昆虫分子生态学、昆虫分类学和昆虫毒理学等各个学科的发展带来巨大的推动作用。

RNAi指靶基因同源的双链RNA(dsRNA)引起该基因编码的mRNA降解，从而特异性抑制该基因的表达，RNAi具有高效性和特异性的特点，广泛存在于动、植物等各种生物体内。赤拟谷盗是具有高效RNAi机制的昆虫，即将dsRNA注射到赤拟谷盗幼虫、蛹、成虫和胚胎的任何时期，可使目的基因的表达受到抑制，而且此抑制效应还可以延续至其下一代。因此，筛选出影响赤拟谷盗发育、存活等的关键标靶，对于加速RNAi技术在害虫防治方面有重要意义。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。本发明人以LOC663462基因为靶标，设计dsRNA，将其注入赤拟谷盗体内，发现明显抑制赤拟谷盗的卵巢发育，产卵数和孵化率显著减少，并且孵化后成虫的虫体明显偏小。表明LOC663462是影响赤拟谷盗的重要靶标基因。

本发明的技术方案如下文所示。

本发明一方面提供了LOC663462的应用，其中，所述LOC663462基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述应用包括：调控昆虫滞育、制备调控昆虫滞育的产品、防治害虫或制备防治害虫的产品。

根据本发明的一些实施方式，所述害虫为鞘翅目昆虫，优选为赤拟谷盗。

根据本发明的一些实施方式，所述昆虫为鞘翅目昆虫，优选为赤拟谷盗。

本发明另一方面还提供了LOC663462基因作为制备特异性干扰有害昆虫基因表达或抑制有害昆虫生长的干扰分子的抑制靶标或沉默靶标的应用，其中，所述LOC663462基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

根据本发明的一些实施方式，所述干扰分子是LOC663462基因或其转录本为抑制靶标或沉默靶标的dsRNA、反义核酸、小干扰RNA、微小RNA的构建物，或者能表达或形成所述dsRNA、反义核酸、小干扰RNA、微小RNA的构建物。

根据本发明的一些实施方式，所述有害昆虫为鞘翅目昆虫，优选为赤拟谷盗。

本发明另一方面还提供一种防治有害昆虫的方法，所述方法包括：下调有害昆虫体内LOC663462基因的表达或活性；其中，所述LOC663462基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。