[发明专利]一种高效抗猪流行性腹泻单克隆抗体制备及工艺

权利要求书

1.一种高效抗猪流行性腹泻单克隆抗体制备及工艺，其特征在于：所述的高效抗猪流行性腹泻单克隆抗体制备及工艺包括以下步骤；

S1，配置基液，首先将PLGA-COOH与NH2-PEG-COOH通过酸胺连接生成PLGA-PEG-COOH，然后将促吞噬肽加入PLGA-PEG-COOH连接生成PLGA-PEG-Tf，最后将阿魏酸，氯仿及佐剂一同添加到PLGA-PEG-Tf中，经过超声波均质得到油相基液，并以10℃—25℃恒温环境保存；

S2，配置抗原，取猪流行性腹泻病毒S1单元和灭活的猪流行性腹泻病毒HN301株，然后对猪流行性腹泻病毒S1单元和灭活的猪流行性腹泻病毒HN301株的N、S基因序列进行PT-PCR方法进行扩增培养，得到重组的PcoldI-N和PcoldI-S，然后将PcoldI-N和PcoldI-S转入到Rosetta感受态细胞中，经IPTG诱导获得重组蛋白，最后用亲和柱对PcoldI-N和PcoldI-S进行纯化，并对纯化后的PcoldI-N和PcoldI-S进行灭活处理；

S3，混合配置，将S2步骤获得的灭活PcoldI-N和PcoldI-S混合并进行至少3次亚克隆，且每次亚克隆均得到一株PEDV N蛋白特异细胞株，然后将各PEDV N蛋白特异细胞株添加到S1步骤制备的基液中，然后进行纯化即可得到成品抗体。

2.根据权利1所述的一种高效抗猪流行性腹泻单克隆抗体制备及工艺，其特征在于：所述的S1步骤中，吞噬肽与PLGA-PEG-COOH通过马来酰胺反应，其浓度配比1:15—30。

3.根据权利1所述的一种高效防止仔猪腹泻的中药制剂及其制备方法的制备方法，其特征在于：所述的S1步骤阿魏酸浓度为2~15mg/mL、PLGA-PEG-Tf浓度为10~100mg/mL。

4.根据权利1所述的一种高效防止仔猪腹泻的中药制剂及其制备方法的制备方法，其特征在于：所述的S2步骤和S3步骤中纯化作业时，采用减压蒸发纯化，减压蒸发时的作业压力为0.01—0.05Mpa。

5.根据权利1所述的一种高效防止仔猪腹泻的中药制剂及其制备方法的制备方法，其特征在于：所述的佐剂为铝胶佐剂、皂苷、油包水乳剂、水包油乳剂、丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物、RIBI佐剂系统、大肠杆菌不耐热肠毒素、IMS 1314、胞壁酰二肽或Gel佐剂中的任意一种或几种共用。