[发明专利]一种菌粕液的制备方法及利用菌粕液的发酵培养基与应用

说明书

本发明涉及微生物技术领域，具体公开了一种菌粕液的制备方法及利用菌粕液的发酵培养基与应用，本发明菌粕液的制备方法包括以下步骤：S1.高山被孢霉发酵；S2.菌粕的水解：将步骤S1制备的菌粕过筛，收集过筛颗粒，加入盐酸混合，然后沸水浴回流水解，得水解液；S3.菌粕液的制备：取出步骤S2制备的水解液迅速冷却，过滤，收集滤液加入氢氧化钠溶液混合，得菌粕液。本发明菌粕液的制备方法操作简单，用料成本低，应用于工业化生产中的可操作性强；并且本发明的菌粕液可以替代部分的氮源应用于发酵培养基中，降低了生产成本，减少了环境污染，且增强了戊糖片球菌的活菌数，此外，本发明发酵培养基还可以应用于菌种的筛选。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其是涉及一种菌粕液的制备方法及利用菌粕液的发酵培养基与应用。

背景技术

花生四烯酸(ARA)的发酵主要是利用高山被孢霉进行生产，高山被孢霉发酵获得霉菌生物体，将富集的霉菌生物体滤干并干燥，浸提获得花生四烯酸(ARA)后的微生物残体，将此微生物残体称为高山被孢霉菌粕。

高山被孢霉菌粕含有较高的蛋白质，其含量可达33％，通过对高山被孢霉菌粕检测分析，该物质的含氮量高达5％以上，含氮量丰富，是优质的氮源；高山被孢霉菌粕虽然具有较高含量的蛋白质，但是其还含有很多大分子量的蛋白，这对于高山被孢霉菌粕的充分利用具有一定的阻碍。有中国专利CN101613724B公开了一种重复利用高山被孢霉菌粕制备花生四烯酸的方法，高山被孢霉菌粕在进行循环使用前采用膨化法对高山被孢霉菌粕进行膨化处理，进行粉碎后，再采用复合酶法对高山被孢霉菌粕进行水解处理。但是该方法采用酶水解具有较高的成本，且操作较繁琐。因此，从经济角度、工业生产的可操作性角度以及菌种的适用性角度，对于高山被孢霉菌粕中营养物质的释放，需要建立一种操作相对简单，成本低，且应用效果好的方法。

并且，在益生菌菌种的大量生产中，常规乳酸菌培养基MRS培养基中具有牛肉膏粉、胰蛋白胨等价格较贵的氮源的添加，造成培养菌种的成本较高，因此，还亟需一种成本低、环境污染小及活菌数高的发酵培养基。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种菌粕液的制备方法及利用菌粕液的发酵培养基与应用，本发明菌粕液的制备方法操作简单，用料成本低，应用于工业化生产中的可操作性强；并且本发明的菌粕液可以替代部分的氮源应用于发酵培养基中，降低了生产成本，减少了环境污染，且增强了戊糖片球菌的活菌数。

本发明的第一目的是提供了一种菌粕液的制备方法，为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种菌粕液的制备方法，包括以下步骤：

S1.高山被孢霉发酵：高山被孢霉发酵培养获得高山被孢霉发酵液，过滤过滤烘干，得干燥菌粕；

S2.菌粕的水解：将步骤S1制备的菌粕过筛，收集过筛颗粒，加入盐酸混合，然后沸水浴回流水解，得水解液；

S3.菌粕液的制备：取出步骤S2制备的水解液迅速冷却，过滤，收集滤液加入氢氧化钠溶液混合，得菌粕液。

在本发明的技术方案中，本发明人采用酸水解的方法将菌粕中的营养物质及氨基酸充分溶解于水中，并采用氢氧化钠进行中和，操作简单，用料成本低，应用于工业生产中的可操作性强。

作为本发明所述菌粕液的制备方法的优选实施方式，所述步骤S2中盐酸的浓度为1-3％，所述菌粕与盐酸的重量比为(1-2)：100。

作为本发明所述菌粕液的制备方法的优选实施方式，所述步骤S3中收集滤液加入质量分数为10-30％的氢氧化钠溶液混合，得pH值为5.8-6.2的菌粕液。

本发明限定了菌粕与盐酸的重量比，并且用氢氧化钠进行中和，使得菌粕中的营养物质及氨基酸可以充分溶解于水中，保证了菌体的增殖及减少了污染物的排放。