[发明专利]一种基因治疗载体及其用途

说明书

本发明涉及一种基因治疗载体及其用途，该基因治疗载体包括：a)左(5′)LTR；b)Psi(ψ)包装信号；c)逆转录病毒输出元件；d)中心多嘌呤区/中央终止序列；e)与编码集落刺激因子1受体多肽的多核苷酸可操作地连接的启动子；f)编码集落刺激因子1受体多肽的多核苷酸；g)转录后调控元件；以及h)右(3′)LTR。该基因治疗载体能够体外改造细胞，使细胞表达CSF1R蛋白，从而治疗HDLS，改善HDLS患者的生存状态。

技术领域

本发明涉及基因治疗技术领域，尤其涉及一种基因治疗载体及其用途。

背景技术

遗传性弥漫性白质脑病合并轴索球样变(HDLS，hereditary diffuseleukoencephalopathy with spheroids)由瑞典医生在1984年首次描述。临床表现包括认知障碍(记忆力下降、言语障碍等)，人格行为改变(抑郁、淡漠、焦虑、易激怒等)，运动功能障碍(行走困难、行动失调、共济失调等)，容易误诊为艾尔兹海默病、额颞叶痴呆、帕金森综合征、多发性硬化及脑白质病。发病年龄为47.2±14.5岁，平均病程6.0±3.1年，死亡年龄为57.2±13.1岁。病理表现为额叶、额顶叶萎缩，脑室扩张，脑白质变形，可观察到髓鞘、轴突丢失以及大量的轴索球样变。目前临床尚无有效的HDLS治疗方法，一般以对症治疗为主，主要包括一般护理、营养支持、抗痫药物及抗生素使用。而对症治疗的方法并不能根治疾病，只能轻微缓解患者症状。因此，急需新的治疗方法以改善HDLS患者的生存状态。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提出一种基因治疗载体及其用途，该基因治疗载体能够体外改造细胞，使细胞表达集落刺激因子1受体(CSF1R)蛋白，从而治疗HDLS，改善HDLS患者的生存状态。

基于上述目的，本发明的第一个方面提供了一种基因治疗载体，该基因治疗载体用于治疗HDLS，其包括：

a)左(5′)LTR；

b)Psi(ψ)包装信号；

c)逆转录病毒输出元件；

d)中心多嘌呤区/中央终止序列；

e)与编码集落刺激因子1受体多肽的多核苷酸可操作地连接的启动子；

f)编码集落刺激因子1受体多肽的多核苷酸；

g)转录后调控元件；以及

h)右(3′)LTR。

在本发明的优选的实施方案中，其中，所述基因治疗载体可以是γ逆转录病毒载体、腺关联病毒(AAV)载体、腺病毒载体或疱疹病毒载体；

优选地，所述基因治疗载体为慢病毒载体。

在本发明的优选的实施方案中，其中，所述慢病毒选自以下：人类免疫缺陷病毒(HIV)、维斯纳-梅迪病毒(VMV)、山羊关节炎-脑炎病毒(CAEV)、马传染性贫血病毒(EIAV)、猫免疫缺陷病毒(FIV)、牛免疫缺陷病毒(BIV)或猿猴免疫缺陷病毒(SIV)；

优选地，所述慢病毒为人类免疫缺陷病毒(HIV)。

在本发明的优选的实施方案中，其中，上述基因治疗载体还包括编码表达标签的核苷酸序列；

优选地，所述表达标签为截短的表皮生长因子受体、萤火虫荧光素酶、增强的绿色荧光蛋白、链霉亲和素结合肽标签(Strep tag II)或Flag标签(Flag tag)。

在本发明的优选的实施方案中，其中，所述左(5′)LTR的启动子由选自以下的异源启动子替换：巨细胞病毒(CMV)启动子、劳斯肉瘤病毒(RSV)启动子或猿猴病毒40(SV40)启动子。

在本发明的优选的实施方案中，其中，所述右(3′)LTR包括一个或多个修饰；