[发明专利]用于纯化核酸探针的纯化膜、纯化柱、纯化试剂盒和纯化方法有效
| 申请号: | 202011480478.0 | 申请日: | 2020-12-15 |
| 公开(公告)号: | CN112553192B | 公开(公告)日: | 2023-07-21 |
| 发明(设计)人: | 彭璨璨;吴诗扬;刘志明;许嘉森 | 申请(专利权)人: | 益善生物技术股份有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 周文波 |
| 地址: | 510700 广东省广州市黄埔区广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 纯化 核酸 探针 试剂盒 方法 | ||
1.一种纯化试剂盒在FISH探针纯化中的应用,其特征在于,所述纯化试剂盒包括纯化柱和纯化试剂;
所述纯化柱包括柱体和装载于所述柱体中的纯化膜;
所述纯化膜包括过滤膜和结合在所述过滤膜上用于去除核酸探针中的非特异性重复序列的锚定成分;所述锚定成分为人类cot-1 DNA;所述过滤膜为玻璃纤维素膜或变性硅胶膜;
所述纯化膜的制备方法包括利用印迹转移的方式将所述锚定成分转移至所述过滤膜上,再对转移的锚定成分进行紫外线照射使其固定结合在所述过滤膜上;
进行所述紫外线照射的时间为6min;进行所述紫外线照射的波长为260nm;
所述纯化试剂包括如下溶液中的至少一种:
洗涤液1、洗涤液2以及洗脱液;
其中,所述洗涤液1包括:48% v/v甲酰胺、0.12 M盐酸胍、0.33 M醋酸钠、4% v/vTritonX-100、6% w/t硫氰酸钠、12mM三羟甲基氨基甲烷-盐酸、以及1% v/v月桂酰肌氨酸钠;
所述洗涤液2包括:70% v/v乙醇、0.12M柠檬酸钠、0.4% w/t N-烷酰肌氨酸、0.2% v/vNP-40、以及7mM 乙二胺四乙酸;
所述洗脱液为10mM Tris-HCl。
2.一种核酸探针的纯化方法,其特征在于,其使用纯化试剂盒对核酸探针进行纯化,所述纯化试剂盒为权利要求1中所述的纯化试剂盒在FISH探针纯化中的应用的试剂盒。
3.根据权利要求2所述的纯化方法,其特征在于,所述核酸探针的探针浓度不低于4ng/μl。
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