[发明专利]检测阿尔兹海默症肠道菌群标志物的表达丰度的方法和装置在审
| 申请号: | 202011474699.7 | 申请日: | 2020-12-14 |
| 公开(公告)号: | CN114622022A | 公开(公告)日: | 2022-06-14 |
| 发明(设计)人: | 陈宇;陈艺菁;陈岳文;许进英;樊颖颖 | 申请(专利权)人: | 中国科学院深圳先进技术研究院 |
| 主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/06;C12Q1/04;C12R1/145;C12R1/01 |
| 代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 潘登 |
| 地址: | 518055 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 检测 阿尔兹海默症 肠道 标志 表达 方法 装置 | ||
1.一种检测阿尔兹海默症肠道菌群标志物的表达丰度的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)根据阿尔兹海默症肠道菌群标志物设计特异性引物,以待测样本的DNA为模板进行PCR扩增,得到PCR扩增产物;
(2)将所述PCR扩增产物构建文库并进行高通量测序,得到的测序数据进行质控和OTU聚类,并计算OTU序列的相对丰度;
(3)将OTU序列与16S rRNA参考基因组进行比对,确定OTU序列的菌属类型,得到不同菌属的相对丰度。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述阿尔兹海默症肠道菌群标志物包括梭状杆菌属(Clostridium)、艾克曼菌属(Akkermansia)、Allobaculum、苏黎世杆菌属(Turicibacter)、Devosia、颤螺菌属(Oscillospira)、Odoribacter或瘤胃球菌属(Ruminococcus)中的任意一种或至少两种的组合;
优选地,所述阿尔兹海默症肠道菌群标志物包括梭状杆菌属(Clostridium)、艾克曼菌属(Akkermansia)、Allobaculum、苏黎世杆菌属(Turicibacter)、Devosia、颤螺菌属(Oscillospira)、Odoribacter和瘤胃球菌属(Ruminococcus)。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述OTU聚类根据序列的一致性进行聚类。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述序列的一致性大于97%形成一个OTU。
5.一种检测阿尔兹海默症肠道菌群标志物的表达丰度的装置,其特征在于,所述装置包括:
PCR扩增单元:用于采用阿尔兹海默症肠道菌群标志物的特异性引物,以待测样本的DNA为模板进行PCR扩增;
高通量测序单元:用于对PCR扩增产物进行文库构建和高通量测序;
聚类和丰度计算单元:用于将测序数据进行质控处理和OTU聚类,并计算OTU序列的相对丰度;
菌属确定单元:用于将OTU序列与16S rRNA参考基因组进行比对,确定OTU序列的菌属类型。
6.根据权利要求5所述的装置,其特征在于,所述阿尔兹海默症肠道菌群标志物包括梭状杆菌属(Clostridium)、艾克曼菌属(Akkermansia)、Allobaculum、苏黎世杆菌属(Turicibacter)、Devosia、颤螺菌属(Oscillospira)、Odoribacter或瘤胃球菌属(Ruminococcus)中的任意一种或至少两种的组合;
优选地,所述阿尔兹海默症肠道菌群标志物包括梭状杆菌属(Clostridium)、艾克曼菌属(Akkermansia)、Allobaculum、苏黎世杆菌属(Turicibacter)、Devosia、颤螺菌属(Oscillospira)、Odoribacter和瘤胃球菌属(Ruminococcus)。
7.根据权利要求5或6所述的装置,其特征在于,所述OTU聚类根据序列的一致性进行聚类。
8.根据权利要求7所述的装置,其特征在于,所述序列的一致性大于97%形成一个OTU。
9.权利要求5-8任一项所述的装置在制备阿尔兹海默症诊断试剂和/或诊断医疗设备中的应用。
10.权利要求5-8任一项所述的装置在筛选阿尔兹海默症治疗药物和/或预防药物中的应用。
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