[发明专利]一种在液体培养基中测定锌离子浓度的方法在审
| 申请号： | 202011459913.1 | 申请日： | 2020-12-11 |
| 公开（公告）号： | CN112683819A | 公开（公告）日： | 2021-04-20 |
| 发明（设计）人： | 曹雁麟;李君剑;张红;陈建文 | 申请（专利权）人： | 山西大学 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31;G01N21/78 |
| 代理公司： | 太原申立德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14115 | 代理人： | 程园园 |
| 地址： | 030006*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 液体 培养基 测定 离子 浓度 方法 | ||
1.一种在液体培养基中测定锌离子浓度的方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)将含有重金属锌离子和菌株的LB液体培养基进行离心，静置后吸取上清液备用，作为试样；
(2)配置多种浓度梯度的试样，向各浓度梯度的试样中加入盐酸溶液，水浴加热后，取出冷却；
(3)在所述各浓度梯度的试样中加入酚酞指示液，用氢氧化钠溶液调节至溶液呈粉色；
(4)配置锌试剂溶液：称取锌试剂溶于无水乙醇中放置过夜，使其全部溶解，并贮于棕色瓶中；
(5)向步骤(3)所述各浓度梯度的试样中加入缓冲溶剂和锌试剂溶液，静置后，再加入明胶和聚乙烯醇，用水稀释至锌试剂溶液颜色无法遮蔽络合物颜色为止；
(6)放置后，在620nm处测定所述各浓度梯度的试样稀释后的吸光度，并绘制浓度曲线图；
(7)根据吸光度来计算锌离子浓度，其公式如下：
锌离子浓度＝(吸光度-0.0045)/0.0028。
2.根据权利要求1所述的一种在液体培养基中测定锌离子浓度的方法，其特征在于：所述步骤(1)中离心的转速为8000r/min，离心的时间为5～10min。
3.根据权利要求1所述的一种在液体培养基中测定锌离子浓度的方法，其特征在于：所述步骤(2)中各浓度梯度的试样的浓度分别为300、500、700、1000、2000mg/Kg，所述盐酸溶液的浓度为0.05mol/L，所述水浴加热的温度为50℃，水浴加热的时间为3～5min。
4.根据权利要求1所述的一种在液体培养基中测定锌离子浓度的方法，其特征在于：所述步骤(3)中酚酞指示液用胶头滴管滴2～3滴，所述氢氧化钠溶液的浓度为0.05mol/L。
5.根据权利要求1所述的一种在液体培养基中测定锌离子浓度的方法，其特征在于：所述步骤(4)中锌试剂为0.5g，无水乙醇为500mL。
6.根据权利要求1所述的一种在液体培养基中测定锌离子浓度的方法，其特征在于：所述步骤(5)中缓冲溶剂为0.05mol/L的磷酸二氢钠-氢氧化钠缓冲液，所述静置的时间为2min，所述各浓度梯度的试样、缓冲溶剂、锌试剂溶液、明胶和聚乙烯醇的体积比为2:1:3:1:1。
7.根据权利要求1所述的一种在液体培养基中测定锌离子浓度的方法，其特征在于：所述步骤(6)中放置的时间为35～55min。
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