[发明专利]异养转自养两步法培养卵囊藻的方法

权利要求书

1.异养转自养两步法培养卵囊藻的方法，其特征在于：包括以下步骤

S1，异养培养，将卵囊藻种子液接种发酵罐中，以铵盐为氮源，以乙酸钠、果糖、蔗糖、葡萄糖为碳源，碳氮比为10:1-50：1，培养过程中监控发酵罐pH，用氨水进行调节，使发酵罐内pH维持在7.5±0.2的范围，发酵生物量达到35000-50000mg/L时结束发酵；

S2，自养培养，将S1得到的卵囊藻藻液作为种子液接种于光反应器中，培养基选用卵囊藻专用培养基，按1‰-3‰接种量接种，培养用水经过次氯酸钠消毒，光照培养，使用光照为3000lux-6000lux，培养至生物量达到400-500mg/L时装罐。

2.根据权利要求1所述的异养转自养两步法培养卵囊藻的方法，其特征在于：卵囊藻专用培养基包括A液和B液，A液配方包括NaNO₃ 50-180g/L，CH₄N₂O 20-50g/L，NaH₂PO₄·2H₂O2-6 g/L，EDTA二钠3-5g/L；FeCl₃·6H₂O 2-3g/L；C₆H₈O₇5-40g/L；B液配方包括，C₆H₈FeNO₇ 3-8g/L，CaCl₂.2H₂O20-50g/L，H₃BO₃2-3g/L，MnCl₂·4H₂O 0.5-3g/L，ZnSO₄·7H₂O 0.2-0.6g/L，Na₂MoO₄.2H₂O 0.3-0.8g/L，CuSO₄.5H₂O 0.5-0.8g/L，Co(NO₃)₂.6H₂O 0.3-0.6g/L，维生素B10.1-0.3g/L，维生素B12 0.005-0.001g/L，生物素0.003-0.005g/L。

3.根据权利要求1所述的异养转自养两步法培养卵囊藻的方法，其特征在于：S1中，发酵生物量达到40000mg/L时结束发酵。

4.根据权利要求1所述的异养转自养两步法培养卵囊藻的方法，其特征在于，S2中，培养至生物量达到400mg/L时装罐。

5.根据权利要求1所述的异养转自养两步法培养卵囊藻的方法，其特征在于：S1中，卵囊藻种子液制备方法如下，步骤(1)为将卵囊藻藻种接种平板上，培养温度25-35℃，培养10天，形成藻落；步骤(2)挑取藻落于20-50mL培养基中震荡培养，培养温度为25-35℃，转速为50-150rpm/min，培养4-6天获得一级种子液；步骤(3)将一级种子液转接于300mL培养基中，培养温度为25-35℃，转速为50-150rpm/min，震荡培养，培养4-6天获得二级种子液；步骤(4)将二级种子液转接于3L培养基中，培养温度为25℃，转速为50-150rpm/min，震荡培养，培养4-6天的种子液作为发酵罐培养藻种。

6.根据权利要求5所述的异养转自养两步法培养卵囊藻的方法，其特征在于：S1中，卵囊藻种子液接种量为2.5-20％。

7.根据权利要求6所述的异养转自养两步法培养卵囊藻的方法，其特征在于：S1中，卵囊藻种子液接种量为10％。