[发明专利]一种Perakine还原酶突变体及其应用

权利要求书

1. 一种Perakine还原酶突变体，其特征在于，该突变体的氨基酸序列在SEQ ID NO.1的基础上发生如下突变之一：

（1）H126位组氨酸单突变：H126G、H126R、H126I、H126C、H126P；

（2）R127位精氨酸单突变：R127M、R127P、R127N、R127S；

（3）H126位组R127双突变：H126G+R127M、H126G+R127P。

2.一种编码基因，其特征在于，编码权利要求1所述Perakine还原酶突变体。

3.一种重组载体，其特征在于，包含权利要求2所述编码基因。

4.权利要求1所述的Perakine还原酶突变体作为催化剂在选择性氢化烯酮双键反应中的应用，其特征在于，选择性氢化烯酮双键反应通过以下步骤实现：以烯酮类化合物为原料，以NADPH为辅酶，以权利要求1所述Perakine还原酶突变体为生物催化剂，在缓冲溶液中进行烯酮双键氢化反应，反应式如下：

在反应过程中NADPH被氧化成NADP⁺，通过辅酶再生系统可将NADP⁺再生为NADPH；

其中底物烯酮的添加量为0.1~30 mM；辅酶再生底物的添加量为0.15 ~ 45 mM，NADP⁺的添加量为0.01~0.3 mM，反应温度为20~55℃，控制反应的pH值为6 ~ 9，反应时间为0.5 ~24 h。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述辅酶再生系统为：以葡萄糖脱氢酶为辅酶再生酶、以葡萄糖为辅酶再生底物、包含NADPH和NADP⁺的葡萄糖脱氢酶辅酶再生系统。