[发明专利]抗CD23蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及生物检测领域，提供了一种抗CD23蛋白单克隆抗体,其重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。用于免疫小鼠的抗原为重组蛋白，所述重组蛋白由SEQ ID No.1所示的核苷酸序列编码，经由大肠杆菌重组表达。发明人还提供了一株分泌抗CD23蛋白的杂交瘤细胞系，所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系9D11B6E6，保藏号为：CGMCC NO.19689。抗CD23蛋白单克隆抗体,具有高特异性、敏感性，可以特异性识别表达CD23蛋白的细胞，适用于免疫学检测，特别是免疫组化检测。

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别涉及抗CD23蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用。

背景技术

CD23也称FcεRII，是人和脊椎动物的IgE低亲和力受体，即IgE的II型受体；它是一种广泛分布于B细胞、嗜酸粒细胞(EOS)、激活的单核/巨噬细胞、血小板、滤泡树突状细胞、朗格汉斯细胞(Langhans Cells)、表皮角细胞、胸腺上皮细胞、部分T细胞、自然杀伤细胞等细胞膜表面的跨膜糖蛋白。分子量为45kDa。，属于典型II型穿膜糖蛋白，由321个氨基酸组成，包括由23个氨基酸残基组成的胞内N-末端、21个氨基酸残基组成的穿膜区及277个氨基酸残基组成的的C-末端膜外区；其羧基末端位于细胞外，氨基末端位于细胞内，属于C型动物凝集素超家族。

人CD23基因位于19号染色体上，是单拷贝基因，有两种类型，由于它们的启动基因不同造成所编码的CD23分子氨基末端的6个氨基酸不同，形成了两种CD23：CD23a和CD23b。CD23a主要在B淋巴细胞和嗜酸性细胞中表达，而CD23b在激活的单核/巨噬细胞、B细胞、嗜酸性粒细胞、血小板、滤泡树突状细胞、朗格汉斯细胞、表皮角细胞、胸腺上皮细胞、部分T细胞、自然杀伤细胞及某些白血病细胞上都有表达。骨髓腔基质来源的巨噬细胞高表达CD23b。细胞膜表面CD23可由自身或被蛋白水解酶裂解为多种大小不等的可溶性片段，称为可溶性CD23(sCD23)，这些片段大部分仍可与IgE结合，且表现出与IgE无关的多种功能。

CD23是多功能受体分子/细胞因子，它参与调节IgE的合成、促进B细胞激活、增殖和分化，并通过与膜CD21的结合介导B-T细胞相互作用、增强B细胞向T细胞提呈抗原，促进T细胞成熟。可溶性CD23(sCD23)还可协同IL-1促进胸腺细胞、骨髓前体细胞、生发中心B细胞增殖和分化，抑制单核细胞游走，诱导单核细胞释放TNF-α、IL-1和IL-6。CD23表达于外周血细胞的某些亚群、B淋巴细胞和EB病毒转染的B淋巴瘤细胞系，在慢性淋巴细胞白血病和部分中心母细胞淋巴瘤中也有0表达；可能通过促进B细胞活化、分化、成熟、防止生发中心B细胞凋亡，使B细胞出现高反应性、合成和分泌自身抗体、引起自身免疫。可溶性CD23(sCD23)与支气管哮喘关系密切，在细胞间粘附、抗原的呈递、T和B细胞的活化、IgE合成、哮喘相关基因的转录等过程中可能发挥重要作用。

CD23与Bc、Tc的增殖与分化有密切关系，同时与许多疾病有关，如:鼻咽癌、慢性B淋巴细胞白血病，这些细胞表面可表达CD23分子。国际上已研制出一些抗人CD23单抗，但抗体种类有限，研制CD23单抗不仅可弥补国际上抗体种类的不足，还填补了国内空白，解决抗体来源困难问题。

发明内容

发明人提供了一种抗CD23蛋白单克隆抗体，所述单克隆抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。

进一步地，所述单克隆抗体重链和轻链可变区氨基酸序列分别是SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列所编码。

进一步地，所述单克隆抗体特异性识别CD23蛋白。

进一步地，所述单克隆抗体特异性识别中SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。