[发明专利]一种VEGF响应提高肿瘤渗透性的核酸-载药纳米材料及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种VEGF响应提高肿瘤渗透性的核酸-载药纳米材料，其特征在于，包括载药纳米粒内核和核酸外壳，所述核酸外壳包括DNA₁、DNA₂、DNA₃和DNA₄，所述DNA₁的5’端修饰有羧基，所述DNA₁的5’端的部分碱基与DNA₂的3’端的部分碱基结合并往DNA₁的3’端方向配对形成双链，所述DNA₂的5’端剩下的部分碱基与DNA₃的3’端的部分碱基结合并往DNA₂的3’端方向配对形成双链；所述DNA₃的5’端的部分碱基与DNA₄的3’端的部分碱基结合并往DNA₃的3’端方向配对形成双链；所述DNA₄的5’端剩下的部分碱基与下一条DNA₃的3’端的部分碱基结合并往DNA₄的3’端方向配对形成双链，所述DNA₃中含有特异识别VEGF蛋白的V7T1核酸适配体，所述V7T1核酸适配体的核苷酸序列为5’-TGTGGGGGTGGACGGGCCGGGTAGA-3’。

2.根据权利要求1所述的核酸-载药纳米材料，其特征在于，所述载药纳米粒为白蛋白纳米粒、血红蛋白纳米粒和乳铁蛋白纳米粒中的任意一种或几种；所述DNA₁为5’-TTTGGGTTAGGGTTAGGGTTAGCG-3’，所述DNA₂为5’-CACATTTTTTTTCCCTAACCCTAACCCTAACCC-3’，所述DNA₃为5’-AAAAAAAATGTGGGGGTGGACGGGCCGGGTAGAAAAAAAA-3’，所述DNA₄为5’-CACATTTTTTTTTTTTTTTTCTAC-3’。

3.根据权利要求1或2所述的核酸-载药纳米材料，其特征在于，所述核酸-载药纳米材料的粒径为70～80nm。

4.一种如权利要求1-3中任一项VEGF响应提高肿瘤渗透性的核酸-载药纳米材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将含羧基疏水抗肿瘤药物通过酰胺化反应和疏水相互作用包载到载药纳米粒中，得到包载有抗肿瘤药物的载药纳米粒；

(2)通过酰胺化反应在所述步骤(1)后得到的载药纳米粒溶液中连接羧基修饰的DNA₁，得到DNA₁修饰的载药纳米粒溶液；

(3)在所述步骤(2)后得到的DNA₁修饰的载药纳米粒溶液中通过碱基互补配对原则连接DNA₂，得到DNA₂/DNA₁修饰的载药纳米粒溶液；

(4)在所述步骤(3)后得到的DNA₂/DNA₁修饰的载药纳米粒溶液进中加入DNA₃和DNA₄进行孵育，最后超滤纯化，即得所述的核酸-载药纳米材料。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述载药纳米粒为白蛋白纳米粒，所述步骤(1)的具体操作包括如下步骤：将含羧基疏水抗肿瘤药物溶于二甲基亚砜，加入羧基活化剂，搅拌反应后，再加入到白蛋白PBS缓冲溶液中，搅拌反应后，离心超滤得到包载有抗肿瘤药物的载药纳米粒。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述抗肿瘤药物为光敏剂二氢卟吩e6；所述白蛋白为人血清白蛋白、牛血清白蛋白或卵清蛋白；所述羧基活化剂包括NHS和EDC.HCl。