[发明专利]一种测定复方苦参注射液总糖含量的方法

权利要求书

1.一种复方苦参注射液总糖含量的检测方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)复方苦参注射液供试品溶液的制备，(2)D-无水葡萄糖对照品溶液的制备，(3)复方苦参注射液供试品的检测，其中采用苯酚硫酸法或蒽酮硫酸法测定供试品溶液总糖含量；优选采用苯酚硫酸法；

所述步骤(1)中复方苦参注射液供试品溶液的制备包括如下：复方苦参注射液加水稀释，在大孔吸附树脂柱进行上样，用水洗脱，收集滤出液，加水稀释，作为样品溶液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中大孔树脂包括AB-8、HPD100或D101；优选AB-8。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中AB-8柱的床容积(BV)为15ml，规格为高15cm，直径Ф1.5cm。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中进一步包括复方苦参注射液上样量为1～3.5ml、优选1ml，上样浓度为稀释1～5倍、优选5倍上样。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中进一步包括上样后吸附0～4h；优选不进行吸附，直接洗脱。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中进一步包括用1BV～8BV、优选3BV水洗脱。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中进一步包括所述滤出液加水稀释250-2000倍，优选650-1400倍，最佳为900-1300倍，作为样品溶液。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中进一步包括收集滤出液至100ml量瓶中，用水稀释至刻度，精密量取1ml至10ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中复方苦参注射液供试品溶液的制备包括如下：精密量取复方苦参注射液2ml至10ml量瓶中，用水稀释刻度，摇匀，精密量取稀释液5ml在AB-8大孔吸附树脂柱上进行上样，用水洗脱，用量为3BV，收集滤出液至100ml量瓶中，用水稀释至刻度，精密量取1ml至10ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，备用。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中D-无水葡萄糖对照品溶液的制备包括如下：精密称取D-无水葡萄糖适量，加水溶解，配成1mg/ml的对照品标准品溶液，备用。

11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)进一步包括复方苦参注射液供试品的检测如下：

精密量取D-无水葡萄糖样品溶液1.0ml，空白取1.0ml蒸馏水，分别置15ml具塞试管中，加入5％苯酚溶液1.0ml，充分振摇后迅速加入浓硫酸5ml，振摇，迅速移至80℃水浴中保温10min，冰浴中冷却3min，显色后3h内于485～489nm、优选487nm处测定其吸光度，并根据标准曲线计算样品含量。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中所述标准曲线按以下方法制作：

精密称取D-无水葡萄糖，加水溶解，配成28.0-92.0μg/ml浓度范围内不同浓度的对照品标准系列溶液，以符合D-无水葡萄糖标准曲线的制备；

然后精密量取上述对照品标准系列溶液各1.0ml，空白取1.0ml蒸馏水，分别置15ml具塞试管中，加入5％苯酚溶液1.0ml，充分振摇后迅速加入浓硫酸5ml，振摇，迅速移至80℃水浴中保温10min，冰浴中冷却3min，于487nm处测定其吸光度，以吸光度值为纵坐标，浓度为横坐标作标准曲线。

13.根据权利要求1～12任一所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括：

(1)复方苦参注射液供试品溶液制备：精密量取复方苦参注射液2ml至10ml量瓶中，用水稀释刻度，摇匀，精密量取稀释液5ml在AB-8柱上样，用水洗脱，用量为3BV，收集滤出液至100ml量瓶中，用水稀释至刻度，精密量取1ml至10ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，备用；

(2)D-无水葡萄糖对照品溶液的制备包括如下：精密称取D-无水葡萄糖适量，加水溶解，配成1mg/ml的对照品溶液；然后配置成28，44，60，76，92μg/ml的对照品标准系列溶液；

(3-1)称取苯酚，加入碳酸氢钠，常压蒸馏，接收馏分，放置阴凉干燥处，备用；然后称取此馏分苯酚5g，加水溶解，转移至100ml棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得5％苯酚溶液，备用；

(3-2)复方苦参注射液样品溶液的检测：精密量取样品溶液1.0ml，空白取1.0ml蒸馏水，分别置15ml具塞试管中，加入5％苯酚溶液1.0ml，充分振摇后迅速加入浓硫酸5ml，振摇，迅速移至80℃水浴中保温10min，冰浴中冷却3min，于487nm处测定其吸光度，并根据标准曲线计算样品含量。