[发明专利]一种合成On-DNA吡唑并[1，5-a]嘧啶化合物的方法

权利要求书

1.一种合成On-DNA吡唑并[1，5-a]嘧啶化合物的方法，其特征在于：向摩尔当量为1，摩尔浓度为0.5-5mM的On-DNAα,β-不饱和羰基化合物溶液中，加入10～1000倍摩尔当量的3-氨基吡唑化合物、10～1000倍摩尔当量的NaOH，最后再加入10-500倍摩尔当量的I₂，反应得到On-DNA产物；所述反应的加料顺序为先加入On-DNA α,β-不饱和羰基化合物，再加入3-氨基吡唑化合物和NaOH在80℃反应8小时，最后加入I₂在25℃反应16小时；其中On-DNA α,β-不饱和羰基化合物的结构式为3-氨基吡唑化合物的结构式为

其中，结构式中DNA包含由人工修饰的和/或未修饰的核苷酸单体聚合得到的单链或双链的核苷酸链；

所述的R₂、R₄分别独立地选自烷基、取代烷基、羧基、5～10元芳基、取代5～10元芳基、5-10元芳杂环基、取代5-10元芳杂环基；其中，所述烷基为C₁～C₂₀烷基或C₃～C₈环烷基；取代烷基的取代基的数量为一个或多个；取代烷基的取代基是相互独立的选自卤素、羧基、硝基、烷氧基、卤代苯基、苯基、烷基苯基、杂环基中的一种或多种；取代5～10元芳基的取代基的数量为一个或多个，取代5～10元芳基的取代基是相互独立的选自卤素、氰基、硝基、羧基、烷氧基、C₁～C₂₀烷基、三氟甲基中的一种或多种；取代5-10元芳杂环基的取代基的数量为一个或多个，取代5-10元芳杂环基的取代基是相互独立的选自卤素、氰基、硝基、羧基、烷氧基、C₁～C₂₀烷基、三氟甲基中的一种或多种；

所述的R₁、R₃分别独立地选自5～10元芳基、取代5～10元芳基、5-10元芳杂环基、取代5-10元芳杂环基；取代5～10元芳基的取代基的数量为一个或多个，取代5～10元芳基的取代基是相互独立的选自卤素、氰基、硝基、羧基、烷氧基、C₁～C₂₀烷基、三氟甲基中的一种或多种；取代5-10元芳杂环基的取代基的数量为一个或多个，取代5-10元芳杂环基的取代基是相互独立的选自卤素、氰基、硝基、羧基、烷氧基、C₁～C₂₀烷基、三氟甲基中的一种或多种；或者R₁、R₃分别独立的不存在；

所述R₅选自氢；或R₅分别与R₁、R₂、R₃或R₄成环；

所述R₆、R₆'分别独立地选自氢、C₁～C₂₀烷基、苯基、卤素、-C(O)OR；所述的R选自C₁～C₂₀烷基；或者R₆、R₆'相连形成5-10元环。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述反应在溶剂中进行，溶剂为水、甲醇、乙醇、乙腈、N,N-二甲基乙酰胺、二甲亚砜、无机盐缓冲液、有机酸缓冲液、有机碱缓冲液中任意一种或几种的含水混合溶剂。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法中On-DNA α,β-不饱和羰基化合物的摩尔当量为1，3-氨基吡唑化合物的摩尔当量为300当量、400当量、500当量，NaOH的摩尔当量为300当量、400当量、500当量，I₂的摩尔当量为50当量、100当量、150当量。

4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，所述方法用于批量的多孔板操作。

5.根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，所述方法用于多孔板的DNA编码化合物库的合成。