[发明专利]一种利用航天诱变黑曲霉生产柠檬酸的方法

权利要求书

1.一种利用航天诱变黑曲霉生产柠檬酸的方法，其特征在于：利用编号为CGMCCNo.5751的航天诱变黑曲霉作为菌种，在发酵的过程中添加天然油脂，每升发酵培养基中天然油脂的添加量为10-200mg；天然油脂为玉米油、大豆油、棉籽油中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的一种利用航天诱变黑曲霉生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述天然油脂为玉米油。

3.根据权利要求2所述的一种利用航天诱变黑曲霉生产柠檬酸的方法，其特征在于：每升发酵培养基中玉米油的添加量为10-45mg。

4.根据权利要求1所述的一种利用航天诱变黑曲霉生产柠檬酸的方法，其特征在于：具体的方法如下：

（1）黑曲霉种子液培养：

将培养好的黑曲霉孢子用无菌水配置成黑曲霉孢子悬浮液，将黑曲霉孢子悬浮液无菌接入灭菌后的种子培养基，然后对黑曲霉种子液培养；培养周期25h-30h，种子液培养完成；

（2）灭菌：

将天然油脂、发酵培养基分别灭菌，待用；

（3）柠檬酸发酵：

将步骤（1）中培养好的黑曲霉种子液无菌转入灭菌降温36℃-37.5℃的发酵培养基，控制发酵条件开始发酵，发酵过程中开始产泡，加入天然油脂，待产柠檬酸速度小于0.1g/(100ml.h)时，发酵结束。

5.根据权利要求4所述的一种利用航天诱变黑曲霉生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述步骤（1）中种子培养基中的接种量为30-45万个/mL。

6.根据权利要求4所述的一种利用航天诱变黑曲霉生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述步骤（1）培养条件为：压力0.08-0.12Mpa、温度36.5-38.5℃、通风比0.18-0.22 vvm,搅拌转速250-350rpm。

7.根据权利要求4所述的一种利用航天诱变黑曲霉生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述步骤（2）的灭菌条件为121℃灭菌30分钟。

8.根据权利要求4所述的一种利用航天诱变黑曲霉生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述步骤（3）中发酵培养基的体积与种子液的体积比为9-10:1。

9.根据权利要求4所述的一种利用航天诱变黑曲霉生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述步骤（3）中发酵培养条件为：压力0.06-0.12Mpa、温度36.0-38.5℃、通风比0.18-0.25vvm,搅拌转速300-350rpm。