[发明专利]一种厨余高效堆肥用高温菌剂制备方法

权利要求书

1.一种厨余高效堆肥用高温菌剂制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

步骤1）采集分离：将厨余堆肥高温期堆肥样品梯度稀释后涂布于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，倒置于60~70℃培养箱中培养24-48h，将形态特征不同的菌落挑出经过3-5次划线纯化和高温培养后分离得到耐高温纯菌株；

步骤2）酶活实验：将分离得到的耐高温纯菌株分别接种至纤维素刚果红培养基、愈创木酚选择培养基、蛋白选择培养基中，培养后筛选出分别能够分解纤维素、木质素和蛋白质的专一高效菌株；

步骤3）菌种发酵：根据步骤2）实验结果挑选能够分解纤维素、木质素和蛋白质的菌株，将菌株分别接种于改良的牛肉膏蛋白胨固态斜面上，在65℃-70℃下培养24-48h得到丰厚的培养斜面，分别取培养至丰厚的斜面1个，接种至1000ml已经灭菌的改良的牛肉膏蛋白胨液态培养基中，置于恒温摇床上，在65℃-70℃、转速180rpm震荡培养24-48h得到发酵种子液；

步骤4）菌液复配：将纤维素、木质素、蛋白质分解菌的发酵菌液分别按照1~3:1~2:1~5体积比进行复合配比；

步骤5）制备固态高温菌剂：以有机废弃物产品为载体与菌液混合，干燥、粉碎、筛分得到能够分解纤维素、木质素、蛋白质的堆肥固态高温菌剂。

2.根据权利要求1所述的厨余堆肥专用高温菌剂制备方法，其特征在于，所述有机废弃物产品载体为园林垃圾或绿化垃圾堆肥腐熟期样品产品，粒径在5mm以下，含水率在40%以下。

3.根据权利要求2所述的厨余堆肥专用高温菌剂制备方法，其特征在于，所述菌液与腐熟堆肥的质量比为1~3：20。

4.根据权利要求3所述的厨余堆肥专用高温菌剂制备方法，其特征在于，所述菌剂活菌含量达到1×10⁹cfu/g以上。

5.根据权利要求3或4所述的厨余堆肥专用高温菌剂制备方法，其特征在于，所述菌液活菌含量达到1×10¹²cfu/mL以上。

6.根据权利要求5所述的厨余堆肥专用高温菌剂制备方法，其特征在于，所述固态高温菌剂与厨余混合的质量比为0.5~2:10。

7.根据权利要求5所述的厨余堆肥专用高温菌剂制备方法，其特征在于，所述改良的牛肉膏蛋白胨配方为：牛肉膏3.0 g，蛋白胨10.0 g，NaCl5.0 g，琼脂10-15g，浸提液1000ml，pH7.4-7.6；

所述浸提液制备方法为：称取100-150g厨余堆肥腐熟期产品，加入300ml蒸馏水,在室温下，180-200rpm震荡10-16小时；取液体在4000rpm下离心10-20min，收集上清液即为浸提液母液，使用时用蒸馏水稀释3-5倍即可；所述改良牛肉膏蛋白胨液态培养基和固态培养基的区别是不含琼脂。