[发明专利]一种餐厨垃圾堆肥复合微生物菌剂的制备方法在审
| 申请号: | 202011300608.8 | 申请日: | 2020-11-19 |
| 公开(公告)号: | CN112522135A | 公开(公告)日: | 2021-03-19 |
| 发明(设计)人: | 刘江涛;肖通奋 | 申请(专利权)人: | 浙江延杭智能科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/18;C12N1/14;C05F9/00;C05F11/08;C05F17/20;C12R1/125;C12R1/10;C12R1/865;C12R1/885;C12R1/685;C12R1/38;C12R1/25;C12R1/465 |
| 代理公司: | 浙江永鼎律师事务所 33233 | 代理人: | 郭小丽 |
| 地址: | 311121 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 垃圾 堆肥 复合 微生物 制备 方法 | ||
1.一种餐厨垃圾堆肥复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1:进行固体基质预处理;
S2:从餐厨垃圾样品中提取出可以分解餐厨垃圾的多种分解菌,并对该多种分解菌进行培养;
S3:将经过预处理的固体基质与经过S2步骤培养好的多种分解菌进行混合并进一步培养,风干,风干后的产物即为固态的复合微生物菌剂。
2.如权利要求1所述的餐厨垃圾堆肥复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于,所述S1步骤中,进行固体基质预处理的方法为:
将细鼓皮、细锯末用蒸馏水清洗后进行高压灭菌,细鼓皮与细锯末的配置比例为1:1,灭菌条件为121℃,灭菌30分钟,灭菌后太阳下晾晒,并利用灭菌灯继续灭菌,晾晒干燥后收集并碾碎成细粉末。
3.如权利要求1所述的餐厨垃圾堆肥复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于,在所述S2步骤中制备多种分解菌并将多种分解菌培养好的方法包括如下步骤:
S2-1:制备初筛培养基和复筛培养基;
S2-2:取餐厨垃圾的混合液稀释制备成不同浓度样品;
S2-3:将不同浓度样品滴在初筛培养基上进行培养,进而培养出多种菌株;
S2-4:将S2-3培养的多种菌株进行分离纯化,分离纯化后得到各品种纯菌株;
S2-5:将S2-4培养出的各品种的纯的菌株进行初步筛选,筛选出可以将餐厨垃圾物料进行分解的多种分解菌;
S2-6:将S2-5中筛选的多种分解菌的菌株接种到提前制备好的复筛培养基上培养,对分解菌的菌株进行进一步的复筛,以确定出所筛选出的多种分解菌的分解率;
S2-7:将复筛选出的多种分解菌进行拮抗实验;
S2-8:将通过S2-7拮抗实验的多种分解菌通过液态发酵手段进一步地培养。
4.如权利要求3所述的餐厨垃圾堆肥复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于,所述S2-2步骤中,制备不同浓度样品的方法为:
将收集到的餐厨垃圾混合均匀后,取餐厨垃圾加入提前准备好的装有无菌水及若干已灭菌的玻璃珠的第一容器中,餐厨垃圾与无菌水比例为:1g:99ml,摇匀20分钟,使混合液分散充分,此时稀释液为10-1;重复此法,配置一系列浓度的稀释液,依次浓度稀释至10-8。
5.如权利要求3所述的餐厨垃圾堆肥复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于,所述S2-3步骤中,培养出多种菌株的方法为:
选取S2-2步骤中制备的不同浓度样品的稀释液,每个浓度均滴加在初筛培养基上涂布均匀,每个浓度做3-5个对照,10分钟后放入恒温培养箱中,37℃倒置培养24小时,即可得到多种菌株。
6.如权利要求3所述的餐厨垃圾堆肥复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于,所述S2-4步骤中,通过分离纯化方法得到各品种的纯的菌株的方法为:
挑选不同的菌株划线纯化,得到纯的培养物后用斜面保存。
7.如权利要求3所述的餐厨垃圾堆肥复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于,所述S2-5步骤中,初步筛选出多种分解菌的方法为:
根据不同分解菌株分解相应菌落后菌落周围的不同状态,将分离纯化后得到的不同分解菌株滴在相应的初筛培养基上,倒置培养24h后,测定被分解的相应菌落辐射的直径D值及所得菌落的直径d值,每种分解菌重复多个作为对照。
8.如权利要求3所述的餐厨垃圾堆肥复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于,在所述S2-7步骤中,进行拮抗实验的方法为:
以划线的方式,将复筛选出的分解菌的菌株接种到平板上,培养一定时间待菌株特性稳定后,以十字交叉的方式,将复筛选出的几种分解菌的菌株接种在同一培养基上,培养一定时间后观察生长结果。
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