[发明专利]分泌抗FGF18单克隆抗体杂交瘤细胞株及其单抗、应用

说明书

本发明技术提供的分泌抗FGF18单克隆抗体杂交瘤细胞株，分泌抗FGF18单克隆抗体杂交瘤细胞株，杂交瘤细胞株为2C5D6或/和3E4F7，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CGMCC NO.C202091或/和CGMCC NO.C202092。本发明还提供分泌抗FGF18单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体；以及提供了含有所述单克隆抗体的试剂盒；本发明的单克隆抗体能在制备检测FGF18蛋白试剂中应用。本发明通过获得分泌抗FGF18单克隆抗体杂交瘤细胞株，获得针对FGF18不同抗原表位的单克隆抗体2种，特异性强且灵敏度高，可通过配对检测体液(如血液、尿液等)中FGF18蛋白含量，应用于检测FGF18蛋白过量表达或诊断以FGF18蛋白异常表达为表征的疾病的产品的应用。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及FGF18单克隆抗体杂交瘤细胞株。

背景技术

成纤维细胞生长因子(FGFs)是由约150-200氨基酸组成的多肽，以两种密切相关的形式存在，即碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)。FGFs作为细胞间信号分子，在胚胎发生和分化过程中起重要作用。其对很多种属的骨细胞是一种潜在的丝裂原，能诱导包括成纤维细胞，成软骨细胞、平滑肌细胞、成骨细胞、神经外胚层、骨骼肌细胞的复制。其中，FGF18是一个由207氨基酸组成的高度保守蛋白，与已发现的FGFs其他成员有30％-70％的同源性，最早由日本科学家从老鼠胚胎中分离得到。小鼠FGF18与人及大鼠的氨基酸序列具有99.5％和99％的同源性。在结构上，FGF18和FGF8、FGF17相似，为同一亚家族成员，具有70％-80％的氨基酸序列同源性。

FGF18存在于多种细胞类型中，其功能不仅仅局限于骨骼发育，可刺激众多间质细胞和上皮细胞及组织的增殖，包括肺、肾脏、心脏、睾丸、脾脏、骨骼肌和大脑。有研究表明，FGF18是对多种细胞有效的分裂素，在肝脏和小肠发育过程中扮演着重要的角色。此外，FGF18在血管形成、形态发生、肿瘤生长和其他细胞组织发育过程中发挥着重要的作用，例如miR-21-5p靶向结合FGF18基因, 激活PI3K/Akt信号通路,从而促进人鼻咽癌组织及CNE1细胞的增殖；FGF18也是促进卵巢癌进展的一个重要因子。因此FGF18的定量检测具有重要的临床意义。而市场上现有的检测试剂盒，体系中多采用多克隆抗体，抗体特异性差，不能区分FGF18高度同源家族蛋白，由于其抗体本身效价或特异性的原因，也使得其对 FGF18检测的临床效用受到局限，降低了样本检测的特异性，同时也对灵敏度产生一定的影响。因此急需获得特异性识别FGF18蛋白单克隆抗体，满足临床样本检测要求，提高检测的灵敏度和特异性。

本发明通过双抗体夹心的原理，利用高亲和力高特异性配对单克隆抗体制备检测试剂盒，采用全自动化学发光仪检测样品浓度。

发明内容

现有的检测体系中多采用多克隆抗体；抗体特异性差，不能区分FGF18高度同源家族蛋白，由于其抗体本身效价或特异性的原因，也使得其对FGF18检测的临床效用受到局限，降低了样本检测的特异性，同时也对灵敏度产生一定的影响。

为了解决上述存在的问题，本发其中一个目的为提供一种分泌抗FGF18单克隆抗体杂交瘤细胞株；本发明的目的之二在于提供分泌抗FGF18单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体；本发明的目的之三在于提供含有所述单克隆抗体的试剂盒；本发明的目的之四在于提供所述单克隆抗体在制备检测FGF18蛋白试剂中的应用。

本发明技术方案的其中一方面，提供了分泌抗FGF18单克隆抗体杂交瘤细胞株，杂交瘤细胞株为2C5D6和/或3E4F7，保藏于中国典型培养物保藏中心，(保藏中心地址为：中国.武汉.武汉大学，日期：2020-06-19，电话：027-68752319)， 2C5D6保藏编号为CGMCCNO.C202091,3E4F7保藏编号为CGMCC NO.C202092。