[发明专利]一种以柑橘籽为原料制备柑橘籽柠檬苦素的方法

权利要求书

1.一种以柑橘籽为原料制备柑橘籽柠檬苦素的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

(1)柑橘籽预处理：新鲜的柑橘籽以清水清洗，热风干燥，使柑橘籽含水量低于10％；干燥后的柑橘籽放入高速粉碎机中粉碎，过40目筛，得柑橘籽粉，柑橘籽粉用石油醚脱脂提取柑橘籽油至无色，得柑橘籽渣，将柑橘籽渣用清水冲洗，风干，得脱脂柑橘籽粉；

(2)柑橘籽柠檬苦素提取液的制备：称取步骤1)中脱脂柑橘籽粉，将脱脂柑橘籽粉和60～80％乙醇水溶液按质量体积比为1:6～1:12kg/L，加入超声提取装置，进行连续超声提取，100～200目滤网过滤，得到柑橘籽柠檬苦素提取液；

(3)柑橘籽柠檬苦素第一浓缩液的制备：步骤2)得到的柑橘籽柠檬苦素提取液经过旋转蒸发回收乙醇，得到柑橘籽柠檬苦素第一浓缩液，旋转蒸发至柑橘籽柠檬苦素第一浓缩液体积约为柑橘籽柠檬苦素提取液体积的1/3～1/10；

(4)柑橘籽柠檬苦素分离纯化第一洗脱液的制备：步骤3)得到的柑橘籽柠檬苦素第一浓缩液以0.5～5BV/h流速加入装有已预处理的大孔树脂层析柱中进行吸附，层析柱出口排液量等于上样流速，上样吸附完全的层析柱依次用蒸馏水或纯净水、乙醇进行洗脱，接收第一洗脱液；

(5)柑橘籽柠檬苦素第二浓缩液的制备：步骤4)得到的第一洗脱液经过旋转蒸发回收乙醇，得到柑橘籽柠檬苦素第二浓缩液，旋转蒸发至柑橘籽柠檬苦素第二浓缩液体积约为第一洗脱液体积的1/3～1/10；

(6)柑橘籽柠檬苦素二次分离纯化第二洗脱液的制备：步骤5)得到的柑橘籽柠檬苦素第二浓缩液以0.5～5BV/h流速加入装有已预处理的大孔树脂层析柱中进行吸附，层析柱出口排液量等于上样流速，上样吸附完全的层析柱依次用20～40％乙醇和40～95％乙醇进行洗脱，接收第二洗脱液；

(7)高纯度柑橘籽柠檬苦素成品制备：步骤6)得到的第二洗脱液经过旋转蒸发浓缩至第二洗脱液原体积的1/3～1/10，得到高纯度柠檬苦素浓缩液，将高纯度柠檬苦素浓缩液放入真空冷冻干燥机中冷冻干燥，得高纯度柑橘籽柠檬苦素产品。

2.如权利要求1所述的一种以柑橘籽为原料制备柑橘籽柠檬苦素的方法，其特征在于：步骤1)中，热风干燥的温度40～70℃，干燥时间5～24h。

3.如权利要求1所述的一种以柑橘籽为原料制备柑橘籽柠檬苦素的方法，其特征在于：步骤2)中，超声提取方式为连续提取至少2次，每次5～15min，超声功率200～800w，提取温度30～70℃。

4.如权利要求1所述的一种以柑橘籽为原料制备柑橘籽柠檬苦素的方法，其特征在于：步骤4)中，上样吸附完全的层析柱先用蒸馏水或纯净水以流速为1～3BV/h进行洗脱，洗脱1～3h，然后再用40～95％乙醇以1～3BV/h流速进行洗脱，洗脱时间为0.5～1.5h。

5.如权利要求1所述的一种以柑橘籽为原料制备柑橘籽柠檬苦素的方法，其特征在于：步骤3)、步骤5)与步骤7)中旋转蒸发的水浴温度为40～70℃，旋转转速为20～100rpm，真空度为-0.07～-0.09MPa。

6.如权利要求1所述的一种以柑橘籽为原料制备柑橘籽柠檬苦素的方法，其特征在于：步骤4)和步骤6)大孔树脂选用D101B、LS-803C，等非极性或弱极性大孔树脂中的一种，量取的大孔树脂颗粒为通过20目筛，未通过40目筛，层析柱的径高比为1:5～1:20。

7.如权利要求1所述的一种以柑橘籽为原料制备柑橘籽柠檬苦素的方法，其特征在于：步骤6)中吸附完全的层析柱首先用20～40％乙醇以流速为1～3BV/h进行洗脱，洗脱1～2h，然后再用40～95％乙醇以1～3BV/h流速进行洗脱，洗脱时间为0.5～1.5h。

8.如权利要求1所述的一种以柑橘籽为原料制备柑橘籽柠檬苦素的方法，其特征在于：步骤7)真空冷冻干燥机中，真空度＜20pa，温度-68～-56℃，预冻6-10h，干燥后的水含量＜1％。