[发明专利]一种类肝素的制备方法

说明书

本发明提供了一种类肝素的制备方法，该方法具体步骤为：以硫酸软骨素为原料，经多硫酸化、纳滤除杂、过柱处理、过氧化氢、纳滤除盐、冷冻干燥得到精品类肝素。本发明所述的类肝素钠的制备方法，合成工艺简单，生产操作易于控制，生产设备无特殊要求，有机试剂使用少，环保易处理，产品分子量范围稳定、理化指标控制在质量标准范围内，同时产品收率正常，纯度高，杂质少，适合大规模工业化生产。

技术领域

本发明涉及化工技术领域，尤其涉及一种类肝素的制备方法。

背景技术

类肝素即类似肝素的物质，是在化学结构上与肝素有一定程度的类似、具有抗凝血活性的酸性黏多糖类物质。类肝素可以通过与血管内皮表面结合，促进了具有抗血栓活性的内源性氨基多糖的释放，可改善局部微循环，增加血流量及血流速度，从而改善中间代谢，促进皮肤营养的供给及废物的排泄，从而具有抗血栓形成、消炎、止痛、改善患处血液循环、吸收渗出物、治愈水肿及浮肿、促进组织修复等作用；在角质软化剂、天然保湿剂的协同作用下，能够抑制胶原纤维的过度增长，减轻瘢痕形成；并能保留皮肤表面水分，使胶原纤维软化，弹性增强，对增生性瘢痕有软化作用。临床适用于血管栓塞、静脉曲张、浅表静脉炎、软化疤痕等。

同时，以硫酸软骨素进行制备的类肝素作为硫酸化多糖、抗菌谱广，对许多致病菌如化脓性菌(金黄色葡萄球菌)、肠道菌群(大肠杆菌)、致病性真菌(白色念珠菌)、病毒(脊髓灰质炎病毒)等有良好的抑制作用，能够有效地控制发炎病症，改善患处血液循环，吸收渗液，治愈水肿及浮肿。

Petitou等人在美国专利“硫酸软骨素和硫酸皮肤素类硫酸化的硫酸软骨素类衍生物的制备”(US5382570)曾经公开了硫酸化硫酸软骨素的制备方法，但是该方法具有工艺复杂、试剂成本高、不利于工业化生产以及所得产物具有不同的结构和活性等特征，从而限制了其应用。

公开号为CN1789287A的专利说明书中公开了一种多硫酸化硫酸软骨素及其制备方法，其中公开了使用氯磺酸、浓硫酸制备多硫酸化硫酸软骨素的方法，但是由于氯磺酸和浓硫酸具有高度危险性，操作有难度，工业生产中对设备要求高，因而应用受到限制。另外，申请人重复上述文献，产物的收率较低，操作难度高，因而不适合大规模工业化生产。

公开号为CN104877042A的专利说明书中公开了一种类肝素的制备方法，其中公开了使用不同磺化剂制备类肝素的方法，但是没有太多说明类肝素的相关数据，申请人重复上述文献方法时，产物杂质较多，分子量分布不均，不利于产物的使用，并且引入较多有机试剂，不适合大规模工业化生产。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述问题，提供一种类肝素的制备方法，该方法成本低，环保，所用有机试剂少，易于掌握，制备所得类肝素具有分子量稳定、杂质含量低、安全有效、磺化程度稳定的优点。

为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明是通过以下技术方案实现：

一种类肝素的制备方法，包括如下步骤：

1)前处理：将甲酰胺、极性有机溶剂按1：1-10比例混合；

2)磺化反应：将硫酸软骨素溶解于6-10倍体积的步骤1)得到的溶剂中，混合均匀后加入吡啶三氧化硫，于50-90℃的温度下反应2-10h；

3)纳滤除胺：将步骤2)中的混合溶液冷却至室温后，调节pH至7，使用截流分子量为300-3000的纳滤膜进行纳滤操作，纳滤操作期间持续添加去离子水，测得透过液电导率在300-600停止添加去离子水；待固体总重与截流液体积的比值为10-50％W/V时停止纳滤操作，收集液体；

4)离子交换树脂脱蛋白：将步骤3)所得液体依次经过强酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂，进行大分子蛋白处理，收集pH＜5的部分，然后用碱液调节pH至6.5-7.8；