[发明专利]一种甜叶菊的分离纯化方法

说明书

本发明涉及一种甜叶菊的分离纯化方法，用于提取甜叶菊基础物质。所述甜叶菊的分离纯化方法是对甜叶菊进行反相色谱、超临界流体色谱分离纯化，以提取所述化合物。

技术领域

本发明涉及天然产物分离纯化领域，尤其涉及从一种甜叶菊的分离纯化方法及获得的甜叶菊基础物质。

背景技术

甜叶菊(Stevia rebaudianaBertoni，S.rebaudiana)，又名甜菊叶，系菊科甜叶菊属多年生植物。甜叶菊原产于南美巴拉圭的东北高地，1977年，我国从日本引进甜叶菊并进行大规模种植。由于甜叶菊中的二萜糖苷类物质具有高甜度、不易被吸收，低热量的特点，所以甜叶菊是一种理想的甜味剂，可用于预防肥胖症和糖尿病。除了作为甜味剂，药理研究表明甜叶菊具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、降血压、抑菌和抗病毒等诸多活性。为了进一步阐明甜叶菊的药理作用，对其物质基础进行研究至关重要。

甜叶菊物质基础研究主要基于对其化学成分的分离，目前，已知的甜叶菊中的化学成分包括甜菊糖苷类、黄酮类、酚酸类和挥发油等。由于甜叶菊组成复杂，不同种类成分含量差别大，同类成分结构相似，增大了分离难度。基于现代分离技术开展系统的分离纯化工作，对于进一步了解甜叶菊的化学组成，开发利用甜叶菊资源有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种甜叶菊的分离纯化方法，用于分离提取甜叶菊中的化合物，以为甜叶菊的开发提供基础。通过本申请所述分离纯化方法获得了4种新的化合物，可以用于甜叶菊的物质基础研，进而期待在在食品行业或医药行业中获得应用。

根据本发明的一方面，提供一种甜叶菊的分离纯化方法。所述甜叶菊的分离纯化方法是对甜叶菊进行反相色谱、超临界流体色谱分离纯化，以提取甜叶菊基础物质。

在一些实施例中，所述甜叶菊的分离纯化方法包括步骤：以重结晶法处理甜叶菊母液糖，获得母液糖粗品；对所述母液糖粗品进行反相色谱分离，以获得多个粗组分；对粗组分进行超临界流体色谱分离，以获得多个精细组分；以及，对精细组分进行反相色谱分离，以获得甜叶菊基础物质。

在一些实施例中，在所述重结晶处理甜叶菊母液糖的步骤中，以无水甲醇作为溶剂对所述甜叶菊母液糖进行重结晶。

在一些实施例中，所述甜叶菊母液糖与所述无水甲醇的料液比为：每1升无水甲醇中加入120g甜叶菊母液糖。

在一些实施例中，在所述反相色谱分离步骤中，采用十八烷基键合固定相进行分离；流动相为甲醇与水，或者乙腈与水。

在一些实施例中，在对粗组分进行超临界流体色谱分离的步骤中，固定相为C4，流动相为超临界CO₂，甲醇为改性剂，梯度洗脱。

在一些实施例中，所述甜叶菊基础物质具有以下式i-1至i-4所示的结构：

其中，上述化合物的命名为：

式i-1：2,7,10,10-tetramethyl-1-oxaspiro[4.5]deca-3,6-dien-8-one；

式i-2：

(E)-4-(7-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-1a,2a,5-trimethyldecahydronaphtho[2,3-b]oxiren-2-yl)but-3-en-2-one；

式i-3：

5-((4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-2-((3,4,5,6-tetrahydroxytetrahydro-2H-pyran-2-yl)methoxy)tetrahydro-2H-pyran-3-yl)oxy)-5,7,7-trimethyl-4,5,6,7-tetrahydro-1H-inden-1-one；