[发明专利]一种用于东革阿里的减肥降脂特性研究的生物样品分析方法

权利要求书

1.一种用于东革阿里的减肥降脂特性研究的生物样品分析方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）取用于东革阿里的减肥降脂特性研究的生物样品，提取并分离为水溶性代谢物样品和脂质样品；

（2）通过液相色谱-串联质谱对水溶性代谢物样品和/或脂质样品进行检测；

所述水溶性代谢物样品检测时溶于体积分数60-70%的乙腈水溶液，色谱条件为：流动相以体积分数5-10%的乙腈水溶液为A相，体积分数90-95%的乙腈水溶液为B相；色谱柱采用BEH HILIC色谱柱；

和/或，所述脂质样品检测时溶于体积比50：50的二氯甲烷/甲醇混合溶液中，色谱条件为：流动相以体积分数90-95%的乙腈水溶液为A相，体积分数50-55%的乙腈水溶液为B相；色谱柱采用BEH HILIC色谱柱；

所述水溶性代谢物样品检测时的洗脱梯度为：

0-0.10 min，体积分数10% A相+90% B相；

0.10-1.50 min，体积分数10% A相+90% B相；

1.50-5.00 min，体积分数55% A相+45% B相；

5.00-10.0 min，体积分数55% A相+45% B相；

10.0-12.0 min，体积分数10% A相+90% B相；

12.0 -20.0 min，体积分数10% A相+90% B相；

和/或，所述脂质样品检测时的洗脱梯度为：

0-10.0 min，体积分数80% A相+20% B相；

10.0-11.0 min，体积分数2% A相+98% B相；

11.0 -13.0 min，体积分数2% A相+98% B相；

13.0-13.1 min，体积分数99.1% A相+0.9% B相；

13.1-17.0 min，体积分数0% A相+0% B相；

所述步骤（1）中，提取并分离血浆样品的过程包括如下步骤：

（1.1）将血浆样品与甲醇、甲基叔丁基醚和水混合均匀；

（1.2）静置分层，收集下层清液干燥后得到水溶性代谢物样品，收集上层清液干燥后得到脂质样品；

血浆样品、甲醇、甲基叔丁基醚和水的体积比为4:30:100:35；和/或，步骤（1.1）的具体过程为将血浆样品与甲醇和甲基叔丁基醚混合均匀后，在黑暗处静置1-2h，然后与水混合均匀；和/或，步骤（1.2）中静置分层的时间为10-20min；

所述步骤（1）中，提取并分离组织样品的过程包括如下步骤：

（1.1）将组织样品破碎并加入甲醇匀浆得到悬浊液；

（1.2）将匀浆后的悬浊液与甲醇、甲基叔丁基醚和水混合均匀；

（1.3）静置分层，收集下层清液干燥后得到水溶性代谢物样品，收集上层清液干燥后得到脂质样品；

步骤（1.1）的具体过程为将组织样品、钢珠和体积分数80-90%的甲醇混合进性组织匀浆；和/或，所述组织样品和体积分数80-90%的甲醇的用量比例为10 mg：200 µl；和/或，组织样品与步骤（1.2）中所用的甲醇、甲基叔丁基醚和水的用量比例为10 mg：160 µl：1000 µl：300 µl；和/或，步骤（1.2）的具体过程为将浆液与甲醇和甲基叔丁基醚混合均匀后，在黑暗处静置1-2h，然后与水混合均匀；和/或，步骤（1.3）中静置分层的时间为10-20min；

所述生物样品采集自东革阿里降脂减肥的动物模型，所述东革阿里降脂减肥的动物模型的建模方法为：采用东革阿里的提取物的水溶液对高脂饮食的实验动物进行灌胃。

2.按照权利要求1所述的一种用于东革阿里的减肥降脂特性研究的生物样品分析方法，其特征在于，所述实验动物为小白鼠，小黑鼠或裸鼠。

3.按照权利要求1所述的一种用于东革阿里的减肥降脂特性研究的生物样品分析方法，其特征在于：所述组织样品为肝、肾、肺、心或胰样品。