[发明专利]一种基于表面增强拉曼光谱技术的红花染色快速检测方法

说明书

本发明公开了一种基于表面增强拉曼光谱技术的红花染色快速检测方法，属于中药质量检测领域。所述方法包括：(1)将待测样品浸泡于乙醇溶液中，收集提取液；(2)以尼龙膜作为萃取膜，吸附提取液中的染料物质；(3)利用碱性水溶液对尼龙膜上吸附的染料物质进行洗脱，制得待测液；(4)往金纳米棒溶胶中加入巯基乙胺混合，再加入待测液混合，制得检测液，然后进行拉曼光谱采集，得到待测样品的拉曼光谱图，对照标准溶液图谱，对染料种类进行鉴别，或定量检测。本发明采用尼龙膜能够将染色剂从红花乙醇提取液中分离；进而利用AuNRs对于酸性染料具有良好的拉曼增强效应，采用手持式拉曼光谱仪，可实现染料的检测分析。

技术领域

本发明属于中药质量检测领域，具体涉及一种基于表面增强拉曼光谱(SERS)技术检测红花染色的方法。

背景技术

红花，又名刺红花、草红花，是我国传统的中药材，具有活血化瘀、舒筋活络、预防和治疗心脑血管疾病等功效。近年来，红花在临床治疗中大量应用，价格上涨，市场出现了染色的红花以次充好，给用药者带来了极大的安全隐患。国家食品药品监督管理总局(CFDA)发布的《国家食品药品监督管理总局药品检验补充检验方法和检验项目批准件》2013006号、2014016号分别涉及了金橙II等6种染色剂，以监控红花药材的质量。

目前，红花鉴别以人工鉴别为主。易红兵介绍了一种染色红花的快速鉴别方法，从形、色、气味、水试几个方面对染色红花进行鉴别，红花经提取再染色后，虽然颜色与正品红花相似，但仔细检查发现花柱、花冠筒裂片。花药各部位形状卷曲不舒展、颜色模糊；正品红花水浸液呈金黄色，染色样品水浸液呈橙红色且花很快褪色(《一种染色红花的快速鉴别》，中国药业，2012年，第21卷第4期)。人工鉴别对专业要求高，结果容易受到主观因素和客观环境的影响，很难在日常推广，而且无法实现对染色剂的具体类型进行鉴定。

与传统感官相比，智能检测仪器可以实现快速、准确、客观地检测。中药质量评价传统检测方法主要运用色谱、质谱、原子吸收光谱等技术，样品前处理时间长，且大多依靠大型仪器，不适用于现场快速检测。而表面增强拉曼光谱(SERS)技术通过将待测分子吸附到金银纳米粒表面使得其拉曼信号呈指数级增强，具有灵敏度高，专属性强，无荧光漂白，无需复杂前处理等优势，在化学、材料分析、环境与食品安全以及生物医药等领域有了广泛应用，具备中药质量快速检测的良好潜质。

由于上述染料颜色大多相近，特别是痕量染料接近无色，难以采用视检法对添加染料进行鉴别，因此，如何利用SERS技术实现现场的染料鉴别和定量检测是本领域技术人员需要解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于针对红花染色掺假问题，提供一种能够快速、准确鉴别红花染色的检测方法，以监控红花药材的质量。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种基于表面增强拉曼光谱技术的红花染色快速检测方法，包括以下步骤：

(1)将待测样品浸泡于乙醇溶液中，静置提取，收集提取液；

(2)以尼龙膜作为萃取膜，利用微萃取技术吸附提取液中的染料物质；

(3)利用碱性水溶液对尼龙膜滤头上吸附的染料物质进行洗脱，得到洗脱液，往洗脱液中加入同等浓度酸溶液回调pH，制得待测液；

(4)往金纳米棒溶胶中加入巯基乙胺混合，再加入待测液混合，制得检测液，然后进行拉曼光谱采集，得到待测样品的拉曼光谱图，对照标准溶液图谱，对染料种类进行鉴别，或定量检测。

本发明针对的红花染料为酸性染料，具体为金橙Ⅱ、柠檬黄、偶氮玉红、日落黄、酸性红73和胭脂红。