[发明专利]上皮性卵巢癌原位成瘤小鼠模型

说明书

本发明公开了上皮性卵巢癌原位成瘤小鼠模型，包括以下步骤：S1：选取6‑8周龄c57bl/6雌鼠，并对雌鼠进行体检，选取发育正常体检合格的c57bl/6雌鼠饲育一周，并实时对饲养的雌鼠进行观察体检；S2：剔除雌鼠单侧背部毛发，上至上肢，下至下肢，一侧至脊柱，另一侧至腋中线，并进行消毒麻醉；S3：选取脊柱和腋中线连线的中点和脊柱与腋中线垂线的交点，镊子夹起部分皮肤，剪开皮肤和肌肉，消毒止血，找到卵巢和输卵管。本发明上皮性卵巢癌原位成瘤小鼠模型，通过向单侧卵巢囊精准注射1×10⁶个上皮性卵巢癌细胞细胞，成瘤率为100％。

技术领域

本发明涉及卵巢癌原位成瘤技术领域，具体是上皮性卵巢癌原位成瘤小鼠模型。

背景技术

上皮性卵巢癌主要起源于输卵管上皮，相比于卵巢癌皮下成瘤模型和尾静脉注射成瘤模型，上皮性卵巢癌原位成瘤小鼠模型依托于上皮性卵巢癌起源输卵管学说，通过在小鼠输卵管原位注射卵巢癌细胞，模拟人类卵巢癌发生发展的微环境，使成瘤模型更贴合卵巢癌生物学性状，也更适合研究卵巢肿瘤发病，侵袭、转移及后续治疗模式。

现有多种卵巢癌动物模型，包括小鼠皮下移植瘤、尾静脉注射种瘤、卵巢癌原位成瘤等，其中卵巢癌原位模型已经有一定的应用基础。现有的卵巢癌原位模型是将体外培养的卵巢癌细胞注射到动物卵巢表面,从而产生肿瘤，具体为将对数生长期的1×107个人卵巢黏液性腺癌3AO细胞种植于BALB/C雌性裸鼠单侧卵巢实质内，观察裸鼠一般情况及肿瘤生长、浸润转移情况，移植后3～8周解剖裸鼠,对双侧卵巢和各脏器行光镜和免疫组织化学检查，现有的卵巢癌动物模型设计简单，仅能模拟卵巢癌转移瘤，不能模拟人体卵巢癌起病过程，且裸鼠为免疫缺陷鼠，不能用于免疫抑制剂等免疫相关药物研究。

发明内容

本发明的目的在于提供上皮性卵巢癌原位成瘤野生小鼠模型，卵巢癌动物模型贴合卵巢癌发病和腹腔细节，包括肿瘤起源部位、肿瘤微环境等，且动物模型成瘤率为100％，成瘤时间短，发生腹膜和腹腔脏器转移率高，与人卵巢癌生物学行为相似，实现模拟人体卵巢癌起病过程，可用于免疫抑制剂等免疫相关药物研究，解决了上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：上皮性卵巢癌原位成瘤小鼠模型，包括以下步骤：

S1：选取6-8周龄c57bl/6雌鼠，并对雌鼠进行体检，选取发育正常体检合格的c57bl/6雌鼠饲育一周，并实时对饲养的雌鼠进行观察体检；

S2：剔除雌鼠单侧背部毛发，上至上肢，下至下肢，一侧至脊柱，另一侧至腋中线，并进行消毒麻醉；

S3：选取脊柱和腋中线连线的中点和脊柱与腋中线垂线的交点，镊子夹起部分皮肤，剪开皮肤和肌肉，消毒止血，找到卵巢和输卵管；

S4：向单侧卵巢囊中注射上皮性卵巢癌细胞ID8；

S5：缝合肌肉和皮肤，成功构建类上皮性卵巢癌模型。

作为本发明进一步的方案：所述c57bl/6雌鼠的体重为18g-22g，且饲养方式为在无特定病原体条件下的超净层流架中进行饲养，使用灭菌水和无菌饲料供c57bl/6雌鼠自由摄入。

作为本发明再进一步的方案：所述消毒止血具体方法为：采用碘伏棉球消毒皮肤伤口，并使用无菌纱布压迫30s进行止血。

作为本发明再进一步的方案：所述向单侧卵巢囊中注射上皮性卵巢癌细胞ID8的注射器械采用Hamilton 10ul微量进样器，且上皮性卵巢癌细胞ID8注射用量为1×10⁶个/10ul上皮性卵巢癌细胞ID8。

作为本发明再进一步的方案：所述缝合肌肉和皮肤，成功构建类上皮性卵巢癌模型具体包括以下步骤：

S5.1：在卵巢囊注射上皮性卵巢癌细胞ID8的破口处滴注纤维蛋白原和凝血酶；