[发明专利]一种用于检测脂蛋白颗粒浓度的试剂及其使用方法

说明书

本发明公开了一种用于检测脂蛋白颗粒浓度的试剂，所述的试剂由以下组分组成：稀释液、密度液、缓冲液，且所述密度液中包含醇类物质，所述醇类物质的浓度为0.1％‑50％。本发明属于体外诊断领域领域。本发明提供一种用于检测脂蛋白颗粒浓度的试剂，本试剂既可单独检测蛋白颗粒浓度，又可以与其他仪器试剂联用同时检测脂蛋白胆固醇亚组份，而不必分两次检测，节省了时间和成本，具有较高的商业价值，能够广泛地应用于临床检验以及科研实验中。

技术领域

本发明属于体外诊断领域，具体说是一种既能够用于检测血清样本中脂蛋白组分的颗粒浓度的试剂。

背景技术

众所周知，按照脂蛋白的密度不同，可以将脂蛋白分为乳糜微粒(CM)，极低密度脂蛋白(VLDL)，中间密度脂蛋白(IDL)，低密度脂蛋白(LDL)，和高密度脂蛋白(HDL)。临床上，通常测定各类脂蛋白的胆固醇含量，用于指导诊断。目前临床上常规测定的不仅有总胆固醇(T-CH)，还有LDL-C，HDL-C。其中LDL-C的含量过高容易导致动脉粥样硬化，俗称坏胆固醇，而HDL-C对血管具有一定的保护作用，俗称好胆固醇。但最近的研究表面，无论是LDL-C，还是HDL-C均具有异质性，其临床意义也不完全相同。如LDL-C可以分成许多亚组分，小而密低密度脂蛋白胆固醇(sdLDL-C)，由于其结构更加致密，更加容易引起动脉粥样硬化，也称为B型，而大而轻低密度脂蛋白胆固醇(LLDL-C)则相比之下致动脉粥样硬化的能力较弱，又称为A型。在HDL-C中，也可以至少分为两种主要亚组分，如大而轻的HDL2颗粒，以及小而密的HDL3颗粒，一些研究证据已经显示测量HDL的亚组分比仅测量HDL能够更好地反应心血管疾病的风险。

传统地，脂蛋白的检测都是通过检测脂蛋白颗粒中胆固醇的含量来评估。由于技术上的原因，很少有直接检测脂蛋白颗粒浓度的，如VLDL颗粒浓度、LDL颗粒浓度、HDL颗粒浓度。事实上这些脂蛋白颗粒浓度的检测，从另外一个角度反映了体内脂蛋白的水平，具有评估心血管疾病风险的作用。

一种方法是核磁共振法，该方法利用其脂蛋白的甲基上的氢的型号，通过复杂的算法，装换为脂蛋白及其亚组份的颗粒浓度，但是该法的技术门槛较高，不仅仪器昂贵，且对操作人员的要求高，故而该方法更加适合于科研用途，而在临床检验中推广有一定的难度。

公开号为US5284773A，US5633168A的美国专利公开了vertical auto profile(简称 VAP)的相关技术，该技术是利用超速离心分离脂蛋白，用于检测不同脂蛋白的胆固醇含量的方法；美国专利公开号为US9239280B2的发明专利描述了一种(vertical lipoproteinprofile，简称VLP)技术，该技术利用超速离心法分离脂蛋白后，用于检测不同脂蛋白颗粒浓度的方法，与核磁共振法类似，其检测的是脂蛋白的颗粒浓度；公开号为CN110108673A的中国专利则是结合了上述几个专利，公开了一种能够同时检测不同脂蛋白的胆固醇和脂蛋白的颗粒浓度的方法。

但由于上述专利中超速离心分离系统的限制，使得各种脂蛋白之间并不能充分地分离，相邻的脂蛋白之间容易受到干扰。当检测系统为VLP检测系统(所使用的仪器称为血脂颗粒检测仪)时，其散射光信号的检测与脂蛋白颗粒的大小有关，当大小颗粒之间分离得不够充分时，大颗粒对小颗粒的这种影响就更为明显，尤其是LDL-P(相对较小)极容易受到IDL-P(相对较大)、VLDL-P(大颗粒)的干扰，特别是当样本中甘油三酯的浓度较高时，这种干扰更为明显，且这几个项目都会明显受到正干扰，可能是高甘油三酯的样本中，会有一定的乳糜颗粒，其对其他脂蛋白的干扰效果大小依次为VLDL-P、IDL-P、LDL-P。甚至严重时影响LDL-P、IDL-P、VLDL-P等项目的精密度。因此无论是专利US9239280B2 中单独检测脂蛋白颗粒浓度，还是CN110108673A中同时检测脂蛋白胆固醇和脂蛋白颗粒浓度，都表现为较差的精密度和较容易受到高甘油三酯样本的影响。

发明内容