[发明专利]一种替代饲用抗生素的中草药复合物智能筛选方法

权利要求书

1.一种替代饲用抗生素的中草药复合物智能筛选方法，其特征在于，通过以下步骤制备而成：

(1)：按一定比例称取所用中草药残枝，去除杂质后晒干混合粉碎；

(2)：对发酵前中草药中残枝成份分析以及生物学功能性分析；

(3)：按中草药、水、营养盐重量比为2∶8∶6混合，升温至95～100℃浸泡2～4小时，进行中药水溶活性物质浸提和灭菌；

(4)从相应的中草药残枝分离和筛选适用于发酵的菌株，通过16S rDNA鉴定其菌属，测定纤维素酶、木质素酶、木聚糖酶、蛋白酶和淀粉酶的活性，检测分离菌株的溶血性和抗生素耐性等，确立筛选菌株在以相应中草药残枝为底物的成长曲线以及pH和还原糖的变化；

(5)：将步骤(4)中筛选的菌种加入到发酵罐中，并向发酵罐中加入营养物，混匀后得到发酵培养基；

(6)：发酵结束后对发酵液进行过滤，得到的过滤液加入到浓缩机中，将滤渣与浓缩液进行烘干得到块状抗生素替代物，将块状抗生素替代物粉碎即可得到产品；

(7)对发酵后中草药中残枝成份分析以及生物学功能性分析。

2.根据权利要求1所述的一种替代饲用抗生素的中草药复合物智能筛选方法，其特征在于，所述中草药残枝包括杜仲15-29份、黄芪10-20份、藤茶25-35份、桑树16-31份、栀子10-21份。

3.根据权利要求2所述的一种替代饲用抗生素的中草药复合物智能筛选方法，其特征在于，所述中草药残枝的组分及重量成分组成包括：杜仲16份、黄芪14份、藤茶26份、桑树24份、栀子20份。

4.根据权利要求2所述的一种替代饲用抗生素的中草药复合物智能筛选方法，其特征在于，所述中草药残枝的组分及重量成分组成包括：杜仲18份、黄芪20份、藤茶27份、桑树25份、栀子10份。

5.根据权利要求2所述的一种替代饲用抗生素的中草药复合物智能筛选方法，其特征在于，所述中草药残枝的组分及重量成分组成包括：杜仲17份、黄芪18份、藤茶25份、桑树27份、栀子13份。

6.根据权利要求1所述的一种替代饲用抗生素的中草药复合物智能筛选方法，其特征在于，所述步骤(4)中的营养物由糖类、蛋白胨、生长因子、牛肉膏和无机盐类组成，重量比为1：0.35-0.5：0.6-0.8：0.3-0.45：0.2-0.3，所述糖类包括：葡萄糖、蔗糖，所述生长因子包括维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶，所述无机盐类包括钾、钠、铁、镁、钙、磷、硫。

7.根据权利要求1所述的一种替代饲用抗生素的中草药复合物智能筛选方法，其特征在于，步骤(5)中发酵的pH值为7.0-7.3，发酵温度为29℃-31℃。

8.根据权利要求1所述的一种替代饲用抗生素的中草药复合物智能筛选方法，其特征在于，步骤(5)中采用反复半分批式操作进行发酵，反复半分批式的方法为：流加操作完成后，取出部分反应系，剩余部分重新加入一定量底物，再按流加式操作进行。

9.根据权利要求1所述的一种替代饲用抗生素的中草药复合物智能筛选方法，其特征在于，步骤(4)中采用16S rDNA鉴定的方法为：核酸提取→基因扩增→产物纯化→测序反应→序列比对。