[发明专利]一种儿茶酚胺的LC-MS/MS检测方法及预处理试剂盒

权利要求书

1.一种儿茶酚胺的LC-MS/MS检测方法，其特征在于：包含以下步骤：

步骤一：取检测样品置于离心管中，加入内标溶液和稀释液稀释；

步骤二：稀释后溶液加入WCX固相萃取小柱中萃取，萃取后使用淋洗液淋洗；

步骤三：淋洗后真空抽干WCX固相萃取小柱，抽出溶液使用甲酸甲酯溶液进行洗脱，并收集洗脱液，洗脱液用稀有气体吹干后进行复溶；

步骤四：取复溶后溶液通过超细滤膜过滤后置于色谱柱中进行色谱分析。

2.根据权利要求1所述的一种儿茶酚胺的LC-MS/MS检测方法，其特征在于：所述步骤一中内标溶液具体为异丙肾上腺素内标溶液，所述稀释溶液具体为抗坏血酸和乙酸铵混合溶液。

3.根据权利要求2所述的一种儿茶酚胺的LC-MS/MS检测方法，其特征在于：所述稀释液中抗坏血酸质量分数为0.1-0.5％，乙酸铵的浓度为30-60mmol·L^-1，且所述稀释液、内标溶液和检测样本混合比4∶1∶1。

4.根据权利要求1所述的一种儿茶酚胺的LC-MS/MS检测方法，其特征在于：所述步骤二中萃取前WCX固相萃取小柱还需预先用甲醇和去离子水混合液进行活化，所述混合液中甲醇质量分数为30-50％，且萃取过柱速度为0.5ml/min。

5.根据权利要求1所述的一种儿茶酚胺的LC-MS/MS检测方法，其特征在于：所述步骤二中淋洗液具体为10-30mmol/L的乙酸铵和乙腈与异丙醇1∶1混合液，且淋洗时乙酸铵和乙腈与异丙醇混合液依次淋洗，淋洗2-3次。

6.根据权利要求1所述的一种儿茶酚胺的LC-MS/MS检测方法，其特征在于：所述步骤三中真空抽干时间为20-40s，且所述甲酸甲酯质量分数为2-3％。

7.根据权利要求1所述的一种儿茶酚胺的LC-MS/MS检测方法，其特征在于：步骤三中复溶用溶剂为0.2mol/L甲酸溶液，所述复溶溶剂含量为50-150ml。

8.根据权利要求1所述的一种儿茶酚胺的LC-MS/MS检测方法，其特征在于：所述步骤四中超细滤膜过滤直径为200-500nm。

9.根据权利要求1所述的一种儿茶酚胺的LC-MS/MS检测方法，其特征在于：所述步骤四中色谱柱具体为五氟苯基反相色谱柱，所述五氟苯基反相色谱柱以超纯硅胶为基质表面键合五氟苯乙基。

10.一种儿茶酚胺的LC-MS/MS检测预处理试剂盒，其特征在于：所述预处理试剂盒包含WCX固相处理萃取小柱、稀释液以及洗脱液。