[发明专利]一种HER2检测的特异性电化学传感器的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种HER2检测的特异性电化学传感器的构建方法，其特征在于，所述构建方法具体如下：

S1：在Tris-硼酸TBE缓冲溶液中加入AuRu NPs水溶液以及HER2适配体溶液，其中HER2适配体序列为-SH-(CH₂)₆-GCA GCG GTG TGG GG，常温孵育10～14h后，固液分离取固相并将固相重新分散在水中，即得AuRu NPs-Apt-A溶液；

S2：在Tris-硼酸TBE缓冲溶液中加入Au NPs水溶液以及HER2适配体互补链溶液，其中HER2适配体互补链序列为-SH-(CH₂)₆-CC CCA CAC CGC TGC，常温孵育10～14h后，固液分离取固相并将固相重新分散在水中，即得Au NPs-Apt-C溶液；

S3：将所得AuRu NPs-Apt-A溶液与Au NPs-Apt-C溶液混合，常温孵育10～14h后，进行固液分离并将固相物质重新分散在水中，最终得到AuRu NP-Au NP组装体溶液；

S4：取S3中所得AuRu NP-Au NP组装体溶液与GO/Fe₃O₄NSs溶液混合均匀，并于常温下孵育0.5～1.5h后，对所得溶液进行磁性分离，并将带磁性的固相物质重新分散在水中，得到AuRu NP-Au NP组装体@GO/Fe₃O₄ NSs溶液；

S5：使用氧化铝抛光粉对磁性玻碳电极MGCE进行抛光打磨，打磨干净后，使用水和乙醇对电极表面进行润洗，保持电极表面干燥，然后将步骤S4中所得AuRu NP-Au NP组装体@GO/Fe₃O₄ NSs溶液滴加到打磨之后的MGCE上形成AuRu NP-Au NP组装体@GO/Fe₃O₄ NSs电极，待电极表面溶液干燥，再取HER2溶液加到电极表面，在35～40℃温度条件下孵育20～40min，之后冲洗电极，在光照条件下，通过检测AuRu NP-Au NP组装体@GO/Fe₃O₄ NSs电极的电化学信号，以此测定出HER2溶液浓度。

2.根据权利要求1所述的HER2检测的特异性电化学传感器的构建方法，其特征在于，步骤S1中所述AuRu NPs溶液通过以下方法制备得到:

步骤1：将80～100mg PVP与60～80mgCTAB溶解在15～25mL二乙二醇溶液中，并将该溶液搅拌混合，然后将其在190～200℃条件下加热5～15分钟得到溶液1；

步骤2：将30～40mg CTAB与5～10mg RuCl₃·3H₂O分散在1～3mL二乙二醇中，然后向溶液中加入20～30μL浓度为0.05～0.15g/mL的氯金酸的乙醇溶液，得到溶液2；

步骤3：将步骤2中所得溶液2加入到步骤1中所得溶液1中，随后该溶液于190～200℃温度下加热5～15分钟，待反应结束后将溶液冷却至室温后，固液分离取固相即AuRu NPs，最后将其分散在0.5～1.5mL超纯水中。

3.根据权利要求1所述的HER2检测的特异性电化学传感器的构建方法，其特征在于，步骤S1中AuRu NPs与HER2适配体摩尔比为1:50～1:150，所述AuRu NPs水溶液浓度为30～50nM，HER2适配体溶液浓度为1.5～7.5μM。

4.根据权利要求1所述的HER2检测的特异性电化学传感器的构建方法，其特征在于，步骤S2中Au NPs与HER2适配体互补链摩尔比为1:5～1:15。

5.根据权利要求1所述的HER2检测的特异性电化学传感器的构建方法，其特征在于，步骤S3中所述AuRu NPs-Apt-A与Au NPs-Apt-C摩尔比为1:5～1:15。