[发明专利]一种新型的血清甲胎蛋白异质体3测定试剂盒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种甲胎蛋白异质体3测定试剂盒的制备方法，其特征在于，试剂盒含有试剂R1和试剂R2；

试剂R1中含有以下成分：

哌嗪-1 ,4-二乙磺酸缓冲液 50mmol/L；

NaCl 9g/L；

牛血清白蛋白 10g/L；

聚乙二醇6000 8g/L

海藻糖 8g/L

GLAURIN 1%；

proclin300 1ml /L；

试剂R2中含有以下成分：

哌嗪-1 ,4-二乙磺酸缓冲液 50mmol/L；

羊抗人AFP-L3抗体包被胶乳颗粒 15mg/L；

羊抗人AFP-L3抗体包被磁性纳米颗粒 15mg/L；

牛血清白蛋白 5g/L；

聚乙二醇6000 5g/L

海藻糖 5 g/L

GLAURIN 1%；

proclin300 1ml /L；

其中所述百分比为体积比；试剂R1和试剂R2体积比为4:1；

甲胎蛋白异质体3测定试剂盒的制备方法，包括以下步骤：一、羊抗人甲胎蛋白异质体3抗体包被的磁性纳米颗粒的制备方法：取适量300nm修饰的聚乙二醇包覆的磁性纳米颗粒，加入到10ml缓冲液中，使颗粒终浓度为1.0%；然后加入适量羊抗人甲胎蛋白异质体3抗体、1ml 10mmol/L的16-巯基十六烷-1-醇溶液，室温下混合搅拌2小时，加入1ml 10g/L的BSA溶液，10000 rpm离心30分钟，去除上清，所得沉淀即为封闭完成的羊抗人甲胎蛋白异质体3抗体包被的磁性纳米颗粒；二、羊抗人甲胎蛋白异质体3抗体包被胶乳颗粒的制备方法：取适量表面羧基化的聚苯乙烯胶乳颗粒，加入到10ml缓冲液中，使胶乳颗粒终浓度为1.0%；然后加入适量羊抗人甲胎蛋白异质体3抗体、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐及N-羟基丁二酰亚胺，室温下混合搅拌3小时，加入1ml 10g/L的BSA溶液，12000 rpm离心40分钟，去除上清，所得沉淀即为羊抗人甲胎蛋白异质体3抗体包被胶乳颗粒；再按照比例加入其它物质溶解，制成甲胎蛋白异质体3测定试剂盒；所述的羊抗人甲胎蛋白异质体3抗体包被胶乳颗粒为两种不同粒径大小的颗粒，分别为：100nm和200nm，质量比为1:1。

2.一种权利要求1所述的制备方法制备的试剂盒的应用，用于非疾病的辅助诊断和治疗目的测定血清中甲胎蛋白异质体3的浓度。