[发明专利]一种基于铁离子探针-纳米金/玻碳电极修饰电极的黄曲霉毒素的检测方法

说明书

本发明公开了一种基于铁离子探针‑纳米金/玻碳电极修饰电极的黄曲霉毒素的检测方法，属于生物与新医药技术领域。本发明利用纳米金比表面积大、吸附能力强及具有高电子密度、介电特性和催化作用等优点，增强了检测活性和稳定性；其次，采用电聚合的方式制备修饰电极，工艺简单便捷；最后，以Fesupgt;3+/supgt;作为探针，其与黄曲霉毒素结合的特异性使响应信号产生明显波动，能够实现检测的高灵敏性，达到单分子检测水平。本发明在保证高灵敏性、稳定性和实用性的同时，具备价格低廉、操作简单、回收率高、检出限低、响应快等优势，并能够通过对血液、尿液、乳汁中毒素及毒素代谢物进行检测，以实现毒素终端水平的实时监测，以及体内小分子毒素污染的有效检测。

技术领域

本发明属于生物与新医药技术领域，涉及一种基于铁离子探针-纳米金/玻碳电极修饰电极的黄曲霉毒素的检测方法。

背景技术

针对黄曲霉毒素的检测，已有的传统技术方法包括薄层色谱法、高效液相色谱法、液相色谱-质谱法、免疫层析法和酶联免疫吸附法等。以上几种检测方法均为实验室常用的方法，其中应用大型仪器检测，对操作空间要求高、操作复杂、样品前处理工序繁琐且难以实现实时监测，检测结果容易受操作人员及外部环境影响。免疫学检测方法特异性强，但市面上现有产品价格昂贵、不能实现大批量检测且检测次数有限。综合来看，以上这些检测方法不符合黄曲霉毒素实时监测的要求。

为满足现代化快速发展的要求，电化学方法逐渐普及，依靠操作简单、价格低廉、绿色且灵敏度高、响应快等优势特征，在食品检测分析领域特别是黄曲霉毒素检测分析中应用广泛。在此基础上，与一般的电化学分析法不同，电化学传感器具有较高选择性。修饰电极是新近发展起来的测定方法，通过在基体电极表面进行修饰，从而增大电极表面的活性面积，提高电极的选择性、精密度和灵敏度等分析性能，已广泛用于制备检测黄曲霉毒素等的电化学传感器的开发。在众多黄曲霉毒素中，并不是所有毒素都会对人体造成伤害，有些通过代谢会直接排出体外，有些则会通过代谢进入人血液、尿液和乳汁中。如毒性最强的AFB₁本身并不会不能引起病变，但是进入人体后代谢物有剧毒，其代谢主要分三种途径，一是转换成AFM₁、AFQ₁和AFP₁存在乳汁中，其次是进入血液和尿液中形成AFB₁-Ly和AFB₁-NBC两种有毒加合物。但是，目前关于黄曲霉毒素的检测灵敏度不高，且不能对人体组织液及环境中的毒素进行即时检测，因此，针对黄曲霉毒素的人体日常检测并没有得到很好地解决。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种基于铁离子探针-纳米金/玻碳电极修饰电极的黄曲霉毒素的检测方法，实现了人体及其环境中黄曲霉毒素及其代谢物的低限度、高灵敏检测。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明公开了一种基于铁离子探针-纳米金/玻碳电极修饰电极的黄曲霉毒素的检测方法，包括以下步骤：

1)将黄曲霉毒素标准溶液与Fe³⁺溶液混合均匀后，得到含Fe³⁺探针的标准待测液，利用纳米金/玻碳电极修饰电极对不同浓度的含Fe³⁺探针的标准待测液进行检测标定，绘制黄曲霉毒素标准曲线；

2)将含有黄曲霉毒素的待测样品溶液与Fe³⁺溶液混合均匀，制得含Fe³⁺探针的待测样品溶液；

3)利用纳米金/玻碳电极修饰电极浸入含Fe³⁺探针的待测样品溶液中进行检测，根据步骤1)所得黄曲霉毒素标准曲线即可得到含Fe³⁺探针的待测样品溶液中的黄曲霉毒素含量。