[发明专利]一种生物3D打印皮肤修复支架

权利要求书

1.一种生物3D打印皮肤修复支架，其特征在于，包括呈水凝胶形式的依次叠加的表皮层、真皮层和皮下组织层；

所述表皮层的水凝胶组成包括海藻酸钠10-40mg/ml，明胶10-40mg/ml，胶原蛋白5-20mg/ml，透明质酸1-5mg/ml，弹性蛋白0.1-5mg/ml，层粘连蛋白0.1-5mg/ml，甘油50-100mg/ml；所述真皮层的水凝胶组成包括海藻酸钠15-35mg/ml，明胶10-35mg/ml，胶原蛋白1-10mg/ml，透明质酸1-10mg/ml，甘油50-100mg/ml；所述皮下组织层的水凝胶组成包括海藻酸钠10-30mg/ml，明胶10-30mg/ml，胶原蛋白1-10mg/ml，透明质酸1-5mg/ml；所述mg/ml指的是相应组分与配制溶液的质量体积比。

2.根据权利要求1所述的皮肤修复支架，其特征在于，所述表皮层、真皮层和皮下组织层的水凝胶中，所述海藻酸钠的部分或全部为氧化海藻酸钠。

3.根据权利要求1所述的皮肤修复支架，其特征在于，所述表皮层、真皮层和皮下组织层均包括抗菌成分。

4.根据权利要求1所述的皮肤修复支架，其特征在于，所述表皮层、真皮层和皮下组织层均包括生长因子，用于促进细胞在皮肤修复支架中的生长增殖；表皮层包括角质细胞生长因子(KGF)或上皮细胞生长因子(EGF)1-10ng/ml，真皮层包括成纤维细胞生长因子(FGF)10-20ng/ml，皮下组织层包括血管内皮生长因子(VEGF)0.1-1.0ng/ml；所述ng/mL指的是相应组分与配制溶液的质量体积比。

5.根据权利要求1所述的皮肤修复支架，其特征在于，还包括覆盖在表皮上面的呈水凝胶形式的致密层，所述致密层的水凝胶组成包括海藻酸钠15-40mg/ml，明胶10-35mg/ml，甘油50-100mg/L，透明质酸1-10mg/ml；所述mg/ml指的是相应组分与配制溶液的质量体积比。

6.根据权利要求1所述的皮肤修复支架，其特征在于，所述表皮层的水凝胶的配制方法为：将透明质酸溶于PBS中，搅拌4-6h溶解混匀，再加入海藻酸钠、明胶、胶原蛋白、弹性蛋白、层粘连蛋白、甘油，在37℃搅拌1-4h溶解混匀，再加入KGF或EGF摇晃混匀；

所述真皮层的水凝胶的配制方法为：将透明质酸溶于PBS中，搅拌4-6h溶解混匀，再加入海藻酸钠、明胶、胶原蛋白、甘油，37℃中搅拌1-4h溶解混匀，再加入FGF摇晃混匀；

所述皮下组织层的水凝胶的配制方法为：将透明质酸溶于PBS中，搅拌4-6h溶解混匀，再加入海藻酸钠、明胶、胶原蛋白，37℃搅拌1-4h溶解混匀，再加入VEGF摇晃混匀。

7.根据权利要求5所述的皮肤修复支架，其特征在于，所述致密层的水凝胶的配制方法为：将透明质酸溶于PBS中，搅拌4-6h溶解混匀，再加入海藻酸钠、明胶和甘油，37℃中搅拌1-4h溶解混匀。

8.一种制备权利要求1-7任一项所述的一种生物3D打印皮肤修复支架的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将配置好的水凝胶分别装置在不同的打印墨盒中，按照设定好的3D打印皮肤修复支架结构进行逐层打印，依次打印表皮层、真皮层和皮下组织层；

(2)打印过程中实时雾化2％-10％氯化钙溶液进行交联并维持打印结构，打印完成后浸泡在氯化钙溶液中交联10-30min；

(3)用PBS清洗两遍后放入-80℃中冷冻过夜，再将支架放入真空冷冻干燥机中12-48h，冻干完成后使用辐照灭菌的方式灭菌处理。