[发明专利]多散射体系自适应荧光检测系统及检测方法

说明书

本发明公开了一种多散射体系自适应荧光检测系统及检测方法，该系统包括：荧光收集透镜、主二向色镜、激发光光路、副二向色镜、第一汇聚透镜、第一光电转换探测器、带通滤光片、第二汇聚透镜以及第二光电转换探测器。本发明能同步检测样品散射的激发光信号和发射的荧光信号，将散射激发光作为参比，从而能根据参比光强对目标荧光能量测量数据自动进行同步修正，可排除不同样品中悬浊颗粒散射不均导致的荧光信号强度差异，进而可消除散射体系变化所导致的定量检测误差，能自适应多种不同散射体系、抗击样品散射不均的干扰，适用于悬浊颗粒大小、表面形态、均匀度存在差异的不同散射体系的悬浊液样品荧光信号检测。

技术领域

本发明涉及光学设备技术领域，特别涉及一种多散射体系自适应荧光检测系统及检测方法。

背景技术

荧光免疫分析是将免疫学反应的特异性和荧光技术的敏感性结合起来的一种方法，多用于检测蛋白质、激素、药物、微生物等生物活性化合物，样品中超大分子团簇易凝聚形成悬浊状态，对入射的激发光以及发射出的荧光产生散射作用。

样品放置时间的长短以及批次的不同使得悬浊颗粒的大小、表面形态、均匀度出现差异(即散射体系的差异)，一方面影响着样品对入射激发光的散射和光能吸收，另一方面也影响着发射出的荧光散射状况及进入检测光路的荧光比例。

传统的荧光检测光路系统只检测进入检测光路的荧光信号，无法应对荧光免疫分析过程中散射体系的差异导致荧光信号强度上出现的误差，从而降低了检测结果定量的准确度。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足，提供一种多散射体系自适应荧光检测系统及检测方法。

本发明能同步检测样品散射的激发光信号和发射的荧光信号，通过以激发光散射信号作为激发参比，可排除不同样品中悬浊颗粒散射不均导致的荧光信号强度差异，能自适应多种不同散射体系、抗击样品散射不均的干扰，适用于悬浊颗粒大小、表面形态、均匀度存在差异的不同散射体系的悬浊液样品荧光信号检测。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种多散射体系自适应荧光检测系统，包括：荧光收集透镜、主二向色镜、激发光光路、副二向色镜、第一汇聚透镜、第一光电转换探测器、带通滤光片、第二汇聚透镜以及第二光电转换探测器；

所述激发光光路发出的呈平行状态的激发光入射至所述主二向色镜后被反射到所述荧光收集透镜上，经所述荧光收集透镜汇聚后照射到样品中；

样品被激发产生的荧光经所述荧光收集透镜准直后依次透射所述主二向色镜、副二向色镜，再经所述带通滤光片滤光后由所述第二汇聚透镜汇聚至所述第二光电转换探测器上；

部分被样品散射的激发光进入所述荧光收集透镜被准直后作为一次激发光照射到所述主二向色镜上，一次激发光中的一部分被所述主二向色镜反射，另一部分透射所述主二向色镜作为二次激发光照射到所述副二向色镜上；二次激发光中的一部分被所述副二向色镜反射，再经所述第一汇聚透镜汇聚至所述第一光电转换探测器上，另一部分透射所述副二向色镜作为三次激发光照射到所述带通滤光片上；三次激发光中的一部分被所述带通滤光片反射，另一部分透射所述带通滤光片作为四次激发光经所述第二汇聚透镜汇聚至所述第二光电转换探测器上。

优选的是，所述主二向色镜和副二向色镜均为低反高通的干涉型滤光片，两者对激发光的反射率均为99%±0.5%。

优选的是，所述带通滤光片对激发光的透过率为1%±0.5%。

优选的是，所述主二向色镜和副二向色镜均为低反高通的干涉型滤光片，两者对激发光的反射率均为99%。

优选的是，所述带通滤光片对激发光的透过率为1%。