[发明专利]一种基于太赫兹波谱技术的微藻细胞中油脂的测定方法

权利要求书

1.一种基于太赫兹波谱技术的微藻细胞中油脂的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、采用傅里叶变换远红外光谱仪测定淀粉标准品的太赫兹光谱曲线，计算淀粉标准品在9.0THz和10.5THz的吸收峰面积值；

S2、制备待测藻细胞样品，并且制备待测微藻薄膜样品；

S3、将步骤S2所得的待测微藻薄膜样品，放置于中空的样品架上，然后放置在傅里叶变换远红外光谱仪的载物台上，傅立叶变换远红外光谱参数设置为分辨率为0.06 THz (2cm^-1)，扫描次数为128次，使用Bruker 66v/s傅里叶变换光谱仪测量范围在2-20.4 THz；

S4、利用淀粉标准品在9.0THz和10.5THz的吸收峰面积S_9.0和S_10.5之和S_淀粉和待测微藻细胞太赫兹光谱曲线在17.3THz处的吸收峰峰强H_17.3，淀粉标准品在9.0THz、10.5THz吸收峰面积之和与17.3THz的太赫兹峰强的比值A=10.5，计算出待测微藻细胞在9.3THz处其含有淀粉的太赫兹吸收峰面积S’_淀粉，即S’_淀粉=A* H _17.3；

S5、将待测微藻细胞在9.3THz的吸收峰面积S_9.3扣除其在9.3THz处其含有淀粉的吸收峰面积S’_淀粉，即得到待测微藻细胞不含淀粉，仅为油脂在9.3THz的吸收峰面积S_油脂，即S_油脂=S_9.3-S’_淀粉；

S6、通过17.3THz处吸收峰峰强和9.3THz处的吸收峰面积的比值的关系，得到油脂含量的计算公式：y=1.133x-0.197，其中y为油脂含量（%），x为仅油脂在9.3THz的吸收峰面积S_油脂，将S_油脂作为x代入到公式中，即得待测微藻细胞中的油脂含量y（%）。

2.如权利要求1所述的一种基于太赫兹波谱技术的微藻细胞中油脂的测定方法，其特征在于，所述步骤S2还包括以下步骤：

S21、选取斜生栅藻为待测微藻，将待测微藻接种到装有微藻培养基的2000ml锥形瓶中，然后置于简易光生物培养机上，控制温度25℃、相对湿度为80%、光照强度2500Lux-3500Lux进行光照培养一周，光照培养过程中每24h中光照12h、黑暗12h，得到微藻液；

S22、取稳定期的微藻作为待测微藻液，在室温下以9000 r / min的速度离心5 min得到藻泥，用蒸馏水洗涤藻泥两次并重复离心；

S23、取湿重200mg藻泥将配成1 ml的藻液添加到直径为20 mm 的平滑聚乙烯模具中，放入烘干机中，并在40℃下干燥6h，最后样品被制成厚度为20μm的薄膜进行测量。

3.如权利要求1所述的一种基于太赫兹波谱技术的微藻细胞中油脂的测定方法，其特征在于，所述步骤S3还包括以下步骤：

S31、消除大气水汽的吸收贡献，仪器的整个光路采用Nidec旋转真空泵，得到待测微藻细胞样品太赫兹光谱原始信息；

S32、然后将所得到的待测微藻细胞样品太赫兹光谱原始信息依次进行基线校正和去噪平滑预处理，最终得到待测微藻细胞的太赫兹光谱曲线，进一步得到待测微藻细胞在9.3THz处的吸收峰面积为S_9.3，在17.3THz的吸收峰峰强为H_17.3。

4.如权利要求1所述的一种基于太赫兹波谱技术的微藻细胞中油脂的测定方法，其特征在于，所述步骤S1还包括以下步骤：

S11、将淀粉标准品压片，放置于中空的样品架上，然后放置在傅里叶变换远红外光谱仪的载物台上，傅立叶变换远红外光谱参数设置为分辨率为0.06 THz (2 cm^-1)，扫描次数为128次，使用Bruker 66v/s傅里叶变换光谱仪测量范围在2-20.4 THz；

S12、消除大气水汽的吸收贡献，仪器的整个光路采用Nidec旋转真空泵，得到待测淀粉标准品太赫兹光谱原始信息，然后将所得到的太赫兹光谱原始信息依次进行基线校正和去噪平滑预处理，最终得到淀粉标准品的太赫兹光谱曲线。

5.如权利要求3或4所述的一种基于太赫兹波谱技术的微藻细胞中油脂的测定方法，其特征在于，所述的基线校正是采用Unscrambler软件对太赫兹光谱原始信息进行处理，所述的去噪平滑处理是采用卷积平滑方法对太赫兹光谱原始信息进行处理。