[发明专利]检测番茄黄化曲叶病毒病抗病基因Ty-1的KASP引物及其应用

权利要求书

1.检测番茄黄化曲叶病毒病抗病基因Ty-1的KASP引物，其特征在于所述KASP引物序列包含：

正向引物Ty-1-F1：5’-TCAATGAACCTCATCTCCATGT-3’，其序列如SEQ No.1；

正向引物Ty-1-F2：5’-TCAATGAACCTCATCTCCATGC-3’,其序列如SEQ No.2；

所述正向引物Ty-1-F1和正向引物Ty-1-F2分别连接有不同的标签序列。

2.根据权利要求1所述的检测番茄黄化曲叶病毒病抗病基因Ty-1的KASP引物，其特征在于在合成KASP引物时，所述正向引物Ty-1-F1的5'端加上标签序列A，标签序列A为：5’-GAAGGTGACCAAGTTCATGCT-3’，其序列如SEQ No.6；所述正向引物Ty-1-F2的5'端加上标签序列B，标签序列B为：5’-GAAGGTCGGAGTCAACGGATT-3’，其序列如SEQ No.7。

3.根据权利要求2所述的检测番茄黄化曲叶病毒病抗病基因Ty-1的KASP引物，其特征在于所述KASP引物序列为：

正向引物1：5’–GAAGGTGACCAAGTTCATGCTTCAATGAACCTCATCTCCATGT-3’，其序列如SEQNo.3；

正向引物2：5’-GAAGGTCGGAGTCAACGGATTTCAATGAACCTCATCTCCATGC-3’，其序列如SEQNo.4。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的检测番茄黄化曲叶病毒病抗病基因Ty-1的KASP引物，其特征在于所述KASP引物序列还包含：

反向引物：5’-TGTTCCCATAAGATAAAAACTGTCA-3’，其序列如SEQ No.5。

5.用于鉴定检测番茄黄化曲叶病毒病抗病基因Ty-1的试剂盒，其特征在于包含权利要求1至4中任一项所述的KASP引物。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于其中还包含：

标签序列A：5’-GAAGGTGACCAAGTTCATGCT-3’，其序列如SEQ No.6；

标签序列B：5’-GAAGGTCGGAGTCAACGGATT-3’，其序列如SEQ No.7；

所述两种标签序列分别与不同的荧光基团相连接；所述两种标签序列的互补序列均与BHQ淬灭基因相连接；标签序列A与FAM荧光基因相连接，标签序列B与HEX荧光基因相连接。

7.根据权利要求1-4中任一所述的KASP引物或权利要求5-6所述的试剂盒在鉴定番茄黄化曲叶病毒病抗病基因Ty-1中的应用。

8.根据权利要求1-4中任一所述的KASP引物或权利要求5-6所述的试剂盒在鉴定番茄中是否含有番茄黄化曲叶病毒病抗病基因Ty-1中的应用。

9.根据权利要求1-4中任一所述的KASP引物或权利要求5-6所述的试剂盒鉴定或区分含有Ty-1的抗番茄黄化曲叶病毒病的番茄和不含有Ty-1的感番茄黄化曲叶病毒病的番茄中的应用。

10.根据权利要求1-4中任一所述的KASP引物或权利要求5-6所述的试剂盒在区分纯合的抗番茄黄化曲叶病毒病的番茄(Ty-1/Ty-1)、纯合的感番茄黄化曲叶病毒病的番茄(ty-1/ty-1)和杂合的抗番茄黄化曲叶病毒病的番茄(Ty-1/ty-1)中的应用。

11.根据权利要求1-4中任一所述的KASP引物或权利要求5-6所述的试剂盒在Ty-1基因在番茄抗TYLCV育种中的应用。

12.根据权利要求8或9中任一项所述的应用，其特征在于是利用试剂盒扩增待检测的番茄样品，检测和分析扩增产物。