[发明专利]新型冠状病毒SARS-Cov-2中和毒性的纳米抗体及其制备方法与应用有效
| 申请号: | 202010926772.3 | 申请日: | 2020-09-07 |
| 公开(公告)号: | CN112010967B | 公开(公告)日: | 2021-03-23 |
| 发明(设计)人: | 庄文超;李福胜;李倩卉;凌志 | 申请(专利权)人: | 康维众和(中山)生物药业有限公司 |
| 主分类号: | C07K16/10 | 分类号: | C07K16/10;C12N15/13;G01N33/569;A61K39/42;A61P31/14;A61P11/00 |
| 代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 肖云 |
| 地址: | 528400 广东省中山市三角镇*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 新型 冠状病毒 sars cov 中和 毒性 纳米 抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种新型冠状病毒SARS-Cov-2中和毒性的纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体为针对SARS-Cov-2病毒RBD蛋白的纳米抗体,包括框架区FR和互补决定区CDR;所述互补决定区CDR包括CDR1、CDR2和CDR3;
所述CDR1的氨基酸序列为如SEQ ID NO.10所示的氨基酸序列;
所述CDR2的氨基酸序列为如SEQ ID NO.12或SEQ ID NO.13所示的氨基酸序列;
其中,若所述CDR2的氨基酸序列为如SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列,则所述CDR3的氨基酸序列为如SEQ ID NO.15或SEQ ID NO.16所示的氨基酸序列;
若所述CDR2的氨基酸序列为如SEQ ID NO.13所示的氨基酸序列,则所述CDR3的氨基酸序列为如SEQ ID NO.17所示的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒SARS-Cov-2中和毒性的纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体还包括框架区FR;所述框架区FR包括FR1、FR2、FR3和FR4;
所述FR1的氨基酸序列选自如SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.20和SEQ ID NO.21所示的氨基酸序列中的至少一种;
所述FR2的氨基酸序列选自如SEQ ID NO.23和SEQ ID NO.24所示的氨基酸序列中的至少一种;
所述FR3的氨基酸序列选自如SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.27和SEQ ID NO.28所示的氨基酸序列中的至少一种;
所述FR4的氨基酸序列为SEQ ID NO.29。
3.根据权利要求1所述的新型冠状病毒SARS-Cov-2中和毒性的纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体的氨基酸序列为如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。
4.根据权利要求1至3任一项所述的新型冠状病毒SARS-Cov-2中和毒性的纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体为与新型冠状病毒SARS-Cov-2 RBD蛋白有高亲和力的氨基酸序列,所述高亲和力是指KD值是在1×10-12~1×10-6之间。
5.权利要求1至4任一项所述的新型冠状病毒SARS-Cov-2中和毒性的纳米抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将如SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列克隆至表达载体中得到重组质粒,将所述重组质粒转入宿主细胞中诱导表达所述纳米抗体;
(2)从宿主细胞中纯化所述纳米抗体。
6.权利要求1至4任一项所述的新型冠状病毒SARS-Cov-2中和毒性的纳米抗体在制备预防和/或治疗新型冠状病毒SARS-Cov-2肺炎的药物中的应用。
7.权利要求1至4任一项所述的新型冠状病毒SARS-Cov-2中和毒性的纳米抗体在制备检测新型冠状病毒SARS-Cov-2的检测试剂或试剂盒中的应用。
8.一种编码新型冠状病毒SARS-Cov-2中和毒性的纳米抗体的基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8所示。
9.一种重组质粒,其特征在于,所述重组质粒中包含如SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列的基因片段中的至少一种。
10.一种重组细胞,其特征在于,所述重组细胞中包含如SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列的基因片段中的至少一种。
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