[发明专利]一种荧光传感器的制备方法

权利要求书

1.一种荧光传感器的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

①设计单链DNA：ssDNA1在链结构中四个碱基的磷酸骨架中的P＝O键依次修饰为P＝S键；ssDNA2为能够特异性识别甲胎蛋白的适配体，ssDNA2不做修饰；ssDNA3与ssDNA1碱基完全互补、与ssDNA2部分碱基互补，ssDNA3不做修饰；

②制备DNA功能化CdTe量子点：调节氯化镉和三巯基丙酸的混合溶液的pH值至10.0，依次加入硼氢化钠、亚碲酸钠和巯基修饰的ssDNA1后加热至95℃，保持温度不变，反应1个小时，得到DNA-QDs溶液，经无水乙醇洗涤、离心后加入PBS缓冲液溶解，利用荧光分光光度计观察其荧光情况；

③制备低浓度的氧化石墨烯溶液：将氧化石墨烯粉末加入纯净水，保持一定温度超声使之溶解，得到高浓度的氧化石墨烯溶液，然后再加入一定量的纯净水进行稀释，得到低浓度的氧化石墨烯溶液；

④将Tris-HCl缓冲液加入至步骤②制得的DNA功能化CdTe量子点和步骤③制得的低浓度的氧化石墨烯溶液的混合液中，利用荧光分光光度计观察其荧光情况；

⑤制备发夹溶液：将ssDNA2和ssDNA3按一定体积比混合，并加入一定量的Tris-HCl缓冲液，充分摇匀后加热到95℃，持续加热五分钟，再在室温下逐渐冷却两个小时；

⑥制备荧光传感器并检测甲胎蛋白溶液：将步骤④制得的溶液、步骤⑤制得的发夹溶液按一定体积比混合后，加入一定浓度的甲胎蛋白溶液，利用荧光分光光度计观察其荧光情况。

2.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤②中氯化镉中的镉元素、三巯基丙酸和亚碲酸钠中的碲元素的摩尔量之比为8：1：1，所述硼氢化钠与亚碲酸钠物质的量之比大于10:1。

3.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤②中DNA-QDs溶液物质的量浓度为0.01-0.03μM。

4.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤③中制得的低浓度氧化石墨烯溶液中氧化石墨烯质量浓度范围为50-100μg/mL。

5.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤④中DNA功能化CdTe量子点、低浓度的氧化石墨烯溶液和Tris-HCl缓冲液的体积比为1:1:3。

6.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤⑤中ssDNA2、ss DNA3和Tris-HCl缓冲液的体积比为1:1:8。

7.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤⑥中步骤④制得的溶液、步骤⑤制得的发夹溶液和甲胎蛋白溶液混合的体积比为5:1:1。

8.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法，其特征在于：所述Tris-HCl缓冲液包括Tris溶液、NaCl溶液和MgCl₂溶液且Tris-HCl缓冲液的PH＝7.4，所述Tris溶液浓度为0.1M，所述NaCl溶液取值范围为50-100mM，所述MgCl₂溶液取值范围为2.5-10mM。

9.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法，其特征在于：所述ssDNA1溶液、ssDNA2溶液的ssDNA3溶液的浓度均相同。