[发明专利]一种D-对羟基苯甘氨酸甲酯含量的检测方法

说明书

本发明公开了一种D‑对羟基苯甘氨酸甲酯含量的检测方法，该方法采用HPLC测量D‑对羟基苯甘氨酸甲酯含量。D‑对羟基苯甘氨酸甲酯用配置好的D‑对羟基苯甘氨酸甲酯稀释液溶解、定容，在一定的柱温下经过碳十八色谱柱以不同的流速洗脱，紫外检测器检测，根据得到的图谱计算D‑对羟基苯甘氨酸甲酯的含量。为了证明该分析方法具有灵敏度高、重现性好、耗时短、结果准确度高等特点，在实验中将其和高氯酸滴定法相比较，实验结果证明采用本实验方法可以快速、准确的测出D‑对羟基苯甘氨酸甲酯的含量，此发明方法对目前市场上测定D‑对羟基苯甘氨酸甲酯含量起到了至关重要的作用。

技术领域

本发明属于医药化工制药检测领域，特别涉及一种D-对羟基苯甘氨酸甲酯含量检测方法。

背景技术

D-对羟基苯甘氨酸甲酯(MethylD-(-)-4-hydroxy-phenylglycinate),分子式为C₉H₁₁NO₃，分子量为181.19,其为白色或类白色结晶性粉末，在水中溶解性差。D-对羟基苯甘氨酸甲酯是一种重要的医药中间体，在国内外都得到广泛的应用，可用于羟氨苄青霉素、羟氨唑头孢菌素等β-内酰胺类抗菌药物的制备,也可用于肽类激素及农药的合成，此类抗生素具有杀菌活性强、毒性低、适应症广及临床疗效好的优点。随着国民经济条件的不断提高，市场上对D-对羟基苯甘氨酸甲酯的质量要求也越来越高，目前市场上有几种D-对羟基苯甘氨酸甲酯含量的检测方法，例如高氯酸滴定法、HPLC法等，但是没有D-对羟基苯甘氨酸甲酯含量分析方法详细的描述。为了保证D-对羟基苯甘氨酸甲酯的质量，D-对羟基苯甘氨酸甲酯含量测定方法尤其重要，因此本发明阐述了种D-对羟基苯甘氨酸甲酯含量HPLC测定方法。

发明内容

1、本发明的目的是提供一种高效的D-对羟基苯甘氨酸甲酯含量检测方法，该检测方法具有耗时短、灵明度高、重现性好等优点。这种检测方法能更快、更准地分析测定D-对羟基苯甘氨酸甲酯的含量，从而保证了用药的安全性，更好的指导药品生产。

2、HPLC方法和高氯酸滴定法分别测量D-对羟基苯甘氨酸甲酯含量，直观地比较两种分析方法结果，凸显了HPLC方法的优越性。

3、HPLC方法测定D-对羟基苯甘氨酸甲酯的含量。

3.1 D-对羟基苯甘氨酸甲酯流动相的制备：（磷酸盐缓冲溶液：乙腈=942：58）0.05mol/L磷酸盐缓冲液（称13.61g磷酸二氢钾加水2000ml溶解，用氢氧化钠溶液调PH=5.00）量取123ml的乙腈混合即得。

3.2本发明所述的高效液相色谱流动相为D-对羟基苯甘氨酸甲酯流动相：此流动相为磷酸缓冲盐溶液和有机相改性剂的混合溶液，配置方法见上述3.1步骤。

3.3高效液相仪的检测器为紫外检测器，根据预处理检测波长220～230nm，优选检测波长225nm。

3.4洗脱液的流速为0.8～1.0ml/min,根据预处理的结果流速优选1.0ml/min。

3.5高效液相仪的柱温控制在20°～25°，选择柱温为25°。

3.6对照品溶液的制备:精密称取D-对羟基苯甘氨酸甲酯对照品2份，各20mg，分别于100ml容量瓶中，加D-对羟基苯甘氨酸甲酯流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。

3.7样品溶液的制备:精密称取D-对羟基苯甘氨酸甲酯样品2份，各20mg，分别于100ml容量瓶中，加D-对羟基苯甘氨酸甲酯流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。

3.8试样中D-对羟基苯甘氨酸甲酯含量按下式计算：

w％= ×100%

式中：

A₁--对照品溶液的峰面积,