[发明专利]一种新型冠状病毒核酸检测试剂盒在审

专利信息
申请号: 202010831484.X 申请日: 2020-08-18
公开(公告)号: CN112301160A 公开(公告)日: 2021-02-02
发明(设计)人: 崔大祥;李雪玲;田静;徐艳;陈晓敏;刘泽熙;梁辉 申请(专利权)人: 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11
代理公司: 上海东亚专利商标代理有限公司 31208 代理人: 董梅
地址: 201109 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 新型 冠状病毒 核酸 检测 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种新型冠状病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,所述新型冠状病毒核酸检测试剂盒含有酶反应体系,通过在酶反应体系下进行扩增反应,确定待测样品中是否存在新型冠状病毒的核酸;

所述的酶反应体系中至少包括扩增引物中的第一引物组、第二引物组或者第三引物组中的一组;

所述的第一引物组含有上游外引物F3:5’-TGGCTACTACCGAAGAGCT-3’ (SEQ ID NO:1)和S下游外引物B3:5’-TGCAGCATTGTTAGCAGGAT-3’ (SEQ ID NO:2);

所述的第二引物组含有上游内引物FIP:5’-TCTGGCCCAGTTCCTAGGTAGTCCAGACGAATTCGTGGTGG-3’ (SEQ ID NO:3)和下游内引物BIP:5’-AGACGGCATCATATGGGTTGCACGGGTGCCAATGTGATCT-3’(SEQ ID NO:4);

所述的第三引物组含有上游环引物LF:5’-GGACTGAGATCTTTCATTTTACCGT-3’(SEQ IDNO:5)和上游环引物LF:5’- ACTGAGGGAGCCTTGAATACA -3’ (SEQ ID NO:6)。

2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的酶反应体系还包括Bst DNA聚合酶反应缓冲液、Mg2+、甜菜碱、dNTP、Bst DNA聚合酶中的一种或者几种。

3.根据权利要求1所述的新型冠状病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的酶反应体系还包括逆转录酶。

4.根据权利要求1所述的新型冠状病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的新型冠状病毒核酸的检测试剂盒还含有显色剂;

所述的显色剂选自:Sybr Green I、Genefinder或GelRed。

5.根据权利要求1-4中任意一种所述的新型冠状病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的新型冠状病毒核酸检测试剂盒含有:

1×Bst DNA聚合酶反应缓冲液,6 mmol/L Mg2+,0.6 mol/L的甜菜碱、1.2 mmol/LdNTP,浓度分别为0.2 μmol/L的F3和B3引物,浓度分别为1.6 μmol/L的FIP和BIP引物,浓度分别为0.4 μmol/L的的LF和LB引物,0.3~0.4 U/μL Bst DNA聚合酶,0.06~0.08 U/ μL逆转录酶。

6.一种权利要求1所述的酶反应体系的应用,其特征在于,所述的酶反应体系在制备检测新型冠状病毒试剂中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,包括使用权利要求1-4中任意一种检测试剂盒检测新型冠状病毒的核酸,包括以下步骤:

在酶反应体系下进行扩增反应;

确定待测样品中是否存在新型冠状病毒的核酸。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的应用还包括通过显色剂辅助判断反应结果是否为阳性的步骤。

9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的扩增反应为在60-65℃条件下反应30-60 min。

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