[发明专利]一种新型冠状病毒核酸检测试剂盒在审
| 申请号: | 202010831484.X | 申请日: | 2020-08-18 |
| 公开(公告)号: | CN112301160A | 公开(公告)日: | 2021-02-02 |
| 发明(设计)人: | 崔大祥;李雪玲;田静;徐艳;陈晓敏;刘泽熙;梁辉 | 申请(专利权)人: | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司: | 上海东亚专利商标代理有限公司 31208 | 代理人: | 董梅 |
| 地址: | 201109 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 新型 冠状病毒 核酸 检测 试剂盒 | ||
1.一种新型冠状病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,所述新型冠状病毒核酸检测试剂盒含有酶反应体系,通过在酶反应体系下进行扩增反应,确定待测样品中是否存在新型冠状病毒的核酸;
所述的酶反应体系中至少包括扩增引物中的第一引物组、第二引物组或者第三引物组中的一组;
所述的第一引物组含有上游外引物F3:5’-TGGCTACTACCGAAGAGCT-3’ (SEQ ID NO:1)和S下游外引物B3:5’-TGCAGCATTGTTAGCAGGAT-3’ (SEQ ID NO:2);
所述的第二引物组含有上游内引物FIP:5’-TCTGGCCCAGTTCCTAGGTAGTCCAGACGAATTCGTGGTGG-3’ (SEQ ID NO:3)和下游内引物BIP:5’-AGACGGCATCATATGGGTTGCACGGGTGCCAATGTGATCT-3’(SEQ ID NO:4);
所述的第三引物组含有上游环引物LF:5’-GGACTGAGATCTTTCATTTTACCGT-3’(SEQ IDNO:5)和上游环引物LF:5’- ACTGAGGGAGCCTTGAATACA -3’ (SEQ ID NO:6)。
2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的酶反应体系还包括Bst DNA聚合酶反应缓冲液、Mg2+、甜菜碱、dNTP、Bst DNA聚合酶中的一种或者几种。
3.根据权利要求1所述的新型冠状病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的酶反应体系还包括逆转录酶。
4.根据权利要求1所述的新型冠状病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的新型冠状病毒核酸的检测试剂盒还含有显色剂;
所述的显色剂选自:Sybr Green I、Genefinder或GelRed。
5.根据权利要求1-4中任意一种所述的新型冠状病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的新型冠状病毒核酸检测试剂盒含有:
1×Bst DNA聚合酶反应缓冲液,6 mmol/L Mg2+,0.6 mol/L的甜菜碱、1.2 mmol/LdNTP,浓度分别为0.2 μmol/L的F3和B3引物,浓度分别为1.6 μmol/L的FIP和BIP引物,浓度分别为0.4 μmol/L的的LF和LB引物,0.3~0.4 U/μL Bst DNA聚合酶,0.06~0.08 U/ μL逆转录酶。
6.一种权利要求1所述的酶反应体系的应用,其特征在于,所述的酶反应体系在制备检测新型冠状病毒试剂中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,包括使用权利要求1-4中任意一种检测试剂盒检测新型冠状病毒的核酸,包括以下步骤:
在酶反应体系下进行扩增反应;
确定待测样品中是否存在新型冠状病毒的核酸。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的应用还包括通过显色剂辅助判断反应结果是否为阳性的步骤。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的扩增反应为在60-65℃条件下反应30-60 min。
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