[发明专利]一种颈痛颗粒指纹图谱的建立方法及其应用

权利要求书

1.一种颈痛颗粒的指纹图谱建立方法，所述方法以三七皂苷R1、延胡索乙素及齐墩果酸为混合标准品；

其特征在于，步骤如下：

(1)供试品溶液的制备：取颈痛颗粒，加入甲醇超声提取，过滤后即得待测液；

(2)对照品溶液制备：取减压干燥至恒重的三七皂苷R1、延胡索乙素及齐墩果酸对照品加入甲醇制成混合对照品溶液；

(3)测定：分别精密量取供试品溶液和对照品溶液，进行HPLC分析，采用梯度洗脱，流动相A相：乙腈，流动相B相：0.15％磷酸水溶液；对高效液相色谱测定所得图谱进行分析处理，即得颈痛颗粒指纹图谱；

所述步骤(1)和(2)之间并不存在先后顺序之分；

所述步骤(3)中色谱柱为CAPCELL PAK C18 MGII，4.6mm×250mm，5μm；流动相流速为1ml/min；柱温为30℃；检测波长为300nm，进样量10μL；

所述步骤(3)中梯度洗脱方式为：0～15min，2％A→15％A；15～30min，15％A→30％A；30～45min，30％A→50％A；45～60min，50％A→65％A；60～75min，65％A→100％A。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中称取颈痛颗粒加入甲醇后超声10-30min。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中称取颈痛颗粒加入甲醇后超声为20min。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，其中颈痛颗粒：甲醇的比为(450-550)mg：(8-12)mL；超声提取后摇匀过滤，滤液过0.22μm微孔滤膜后得供试品溶液。

5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，其中颈痛颗粒：甲醇的比为500mg：10mL。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中混合对照品溶液的配制方法如下：精密称取三七皂苷R1标准品0.0100g、延胡索乙素标准品0.0099g和齐墩果酸标准品0.0099g置10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，配制 混合标准品溶液。

7.权利要求1-6任一项所述方法和/或根据 权利要求1-6所述方法获得的指纹图谱在颈痛颗粒质量控制中的应用。

8.一种颈痛颗粒的质量控制方法，其特征在于，所述方法包括：取多批次颈痛颗粒按照权利要求1-6任一项所述方法得到颈痛颗粒指纹图谱，将多个批次颈痛颗粒指纹图谱按照均值法生成得到对照指纹图谱；

取待检测样品制备供试品溶液，按照权利要求1-6任一项所述方法得到颈痛颗粒指纹图谱；

将待检测样品指纹图谱与颈痛颗粒对照指纹图谱进行相似性比较。

9.如权利要求8所述的质量控制方法，其特征在于，所述相似性比较包括采用夹角余弦法和/或相关系数法进行。