[发明专利]一种HEK293细胞无血清培养基

说明书

本发明公开了一种HEK293细胞无血清培养基，所述HEK293细胞无血清培养基由如下组分组成或包含如下组分：氯化铝、乙酸钡、生物素、氯化镉、泛酸钙、氯化胆碱、氯化钴、氯化铜、葡萄糖、乙醇胺、硝酸铁、叶酸、谷胱甘肽、4‑羟乙基哌嗪乙磺酸、肌醇、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸等多种成分。与现有的培养基相比，本发明的HEK293细胞无血清培养基可明显提高表达量，可以在更短的时间获得更多的抗体或蛋白。

技术领域

本发明涉及细胞培养技术领域，更具体地说，尤其涉及一种HEK293细胞无血清培养基及应用。

背景技术

HEK293细胞是抗体和重组蛋白表达的重要平台。根据表达的时间不同，可将基因产物表达分为瞬时表达与稳定表达。稳定表达是抗体药物生产系统的金标准，不过其过程耗费时间长，费用高，不利于大通量、高效率地筛选新的抗体药物。瞬时基因表达技术是指外源基因进入受体细胞后，存在于游离的载体上，不整合至染色体，较短时间内就可获得目的基因的表达产物，但随着细胞的分裂增殖，这种外源基因最终会消失，表达持续时间为几天到两周。此技术大大缩短了微量至中等量重组抗体的生产过程，从而为抗体药物的快速生产、早期筛选和功能、毒理分析提供有效的手段。

瞬时基因表达技术常用的宿主细胞有HEK293细胞、CHO细胞等，HEK293细胞具有生长速度快，易于转染等优点，在抗体药物的快速高效表达和功能分析时，具有很好的优势。因而HEK293的瞬时表达已成为生物制药企业常用技术平台之一。不过瞬时表达虽然具有快速、简便、易操作的特点，但是蛋白产量有时却不太理想。另外，目前HEK293培养基市场为SIGMA、Invitrogen、Hyclone和Lonza等国际知名培养基占领，价格昂贵，每升高达上千元，不利于企业降低成本。

无血清培养二用不含血清的培养基培养动物细胞的方法。无血清培养基一般是由基础培养基和替代血清的补充因子组成的。无血清培养技术是细胞培养研究中的一个里程碑。由于无血清培养基全部是由已知成分组成的，不仅为研究和阂明细胞生长、增殖和分化的机制这一生命科学中的根本间题提供了有力的工具，而且为现代生物技术如基因工程、蛋白质工程、细胞工程和单克隆抗体等的应用奠定了基础。

目前，缺乏一种可明显提高蛋白表达量、可以在更短的时间获得更多蛋白，更有利于抗体快速生产的HEK293细胞无血清培养基。

发明内容

本发明提供了一种低成本的、高效瞬时表达抗体药物的HEK293细胞无血清培养基及其应用。

为了解决现有技术的问题，一方面，本发明提供了如下技术方案：本发明的一种HEK293细胞无血清培养基，所述的HEK293细胞无血清培养基由如下组分组成或包含如下组分：

在一个实施方式中，所述的HEK293细胞无血清培养基由如下组分组成或包括如下组分：

氯化铝 6.91E-06

乙酸钡 6.28E-06

生物素 1.38E-04

氯化镉 3.58E-05

泛酸钙 7.68E-03

氯化胆碱 1.35E-02

氯化钴 6.75E-06

氯化铜 3.22E-04

葡萄糖 4.00E+00

乙醇胺 4.84E-03

硝酸铁 5.33E-04

叶酸 2.59E-02

谷胱甘肽 6.00E-03