[发明专利]一种用于检测水牛奶中掺入牛奶的特征肽组合及方法有效
| 申请号： | 202010661984.3 | 申请日： | 2020-07-10 |
| 公开（公告）号： | CN111766324B | 公开（公告）日： | 2022-12-06 |
| 发明（设计）人： | 陈颖;张九凯;韩建勋;苗金梁;邢冉冉;李淑娟 | 申请（专利权）人： | 中国检验检疫科学研究院 |
| 主分类号： | C07K7/08 | 分类号： | C07K7/08;C07K7/06 |
| 代理公司： | 北京天盾知识产权代理有限公司 11421 | 代理人： | 宋凌林 |
| 地址： | 100176 *** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 水牛 掺入 牛奶 特征 组合 方法 | ||
1.一种用于检测水牛奶中掺入牛奶的特征肽组合物，其特征在于，水牛奶的特征肽氨基酸序列为HQGLPQGVLNENLLR和LAEEQLHSMK，和牛奶的特征肽氨基酸序列为QVLSNTVPAK。
2.一种检测水牛奶中掺入牛奶的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）对采集得到的水牛奶和牛奶进行冷冻干燥，所得到的冻干奶粉进行复溶；
（2）对复溶所得到的纯乳品进行蛋白浓度测定；
（3）取一定量的蛋白进行蛋白变性处理，使用胰蛋白酶酶解；
（4）酶解所得到的肽段用高效液相色谱-质谱联用技术进行检测；
将得到的候选特异性肽段信息使用QTRAP5500的MRM模式进行验证，根据得到的离子色谱图确定物种特异性肽段，其中水牛奶的特征肽氨基酸序列为HQGLPQGVLNENLLR和LAEEQLHSMK，牛奶的特征肽氨基酸序列为QVLSNTVPAK。
3.如权利要求2所述方法，其特征在于，按照奶粉与蒸馏水的比例为1:20 w/v涡旋混匀，在40℃水浴中震荡30min。
4.如权利要求2所述方法，其特征在于，使用Qubit蛋白测定试剂盒进行蛋白浓度测定。
5.如权利要求2所述方法，其特征在于，取200μg蛋白进行变性处理，加入DTT反应后加入IAA进行避光反应。
6.如权利要求2所述方法，其特征在于，使用胰蛋白酶按照蛋白与酶的比例为20:1的比例进行酶切。
7.如权利要求2所述方法，其特征在于，高效液相色谱的条件为：色谱柱：X BridgePeptide BEH C18 Column，300Å，3.5μm，4.6mm×150mm；流动相A为0.1%甲酸-2%乙腈-98%水溶液；流动相B为0.1%甲酸-2%水-98%乙腈溶液；流速0.4mL/min；柱温40℃，进样体积10μL。
8.如权利要求2所述方法，其特征在于，质谱条件为：ESI正离子扫描参数：气帘气压力35psi，碰撞气：Medium，离子化电压4500V，离子源温度500℃，雾化气65psi，辅助气50psi；正离子扫描MRM模式：MRM检测窗口120s，扫描时间3s。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国检验检疫科学研究院，未经中国检验检疫科学研究院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010661984.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种智能儿童陪伴教育机器人
- 下一篇：复合香型辊压法再造烟叶及其制备方法
