[发明专利]乳腺癌早期筛查的分子标志物及其应用

权利要求书

1.一种用于乳腺癌早期筛查的分子标志物，所述的分子标志物是磷酸化的抗原片段，

所述的磷酸化的抗原片段序列为：CIED(pS)QPE(pS)QVLEDD，其中的pS为磷酸化的丝氨酸；

所述的乳腺癌包括Luminal A、Luminal B、HER2阳性和三阴性乳腺癌。

2.一种制备检测权利要求1所述分子标志物的多克隆抗体的制备方法，所述的方法包括如下步骤：

(1)将所述的磷酸化的抗原片段偶联至载体蛋白上；

(2)将抗原与佐剂混匀，皮下注射入新西兰大白兔背部免疫步骤为：

1)第一次免疫将200μg抗原多肽与1ml弗氏完全佐剂混匀，背部皮下注射于西新兰大白兔；

2)一周后第二次免疫：抗原多肽降至100μg，佐剂转换为弗氏不完全佐剂，两周后耳缘静脉取血验证抗体效价；

3)再过一周后开始下一次免疫，免疫方法同第二次免疫，直至得到高效价的抗体血清；

(3)血清抗体效价验证得到高滴度特异性抗磷酸化53BP1抗体后，得到抗血清。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，

步骤(3)所述的血清抗体效价验证具体方法为：将收集的抗血清与体外培养的约10000个MFC-7肿瘤细胞株的总蛋白提取物进行蛋白印迹杂交，能够清晰的标记出细胞内磷酸化53BP1蛋白时，即为效价合格。

4.一种用于乳腺癌早期筛查的检测试剂盒，所述的试剂盒包含能够识别权利要求1所述分子标志物的检测试剂，

所述的检测试剂为根据权利要求2所述的方法制备得到的多克隆抗体；

所述的乳腺癌包括Luminal A、Luminal B、HER2阳性和三阴性乳腺癌。