[发明专利]一种提高转导效率的慢病毒载体及其应用有效
| 申请号: | 202010629065.8 | 申请日: | 2020-07-02 |
| 公开(公告)号: | CN112062818B | 公开(公告)日: | 2022-05-17 |
| 发明(设计)人: | 王芳;赵斐 | 申请(专利权)人: | 青岛宁逸生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C07K14/145 | 分类号: | C07K14/145;C12N15/867;C12N5/10;C12N7/01;A61K48/00 |
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| 地址: | 266101 山东省青*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 提高 转导 效率 病毒 载体 及其 应用 | ||
1.一种VSVG突变体,其特征在于所述VSVG突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:11或SEQID NO:12所示。
2.如权利要求1所述的VSVG突变体在制备慢病毒载体中的应用。
3.一种包装细胞系在制备慢病毒体系中的应用,其特征在于,所述包装细胞系包含MARCH8缺失的细胞,慢病毒体系包括含有权利要求1所示的VSVG突变体的载体,慢病毒包装质粒表达Gag-Pol 的psPAX2,带有GFP的plenti-GFP。
4.一种生产重组慢病毒的方法,包括培养包含MARCH8缺失的细胞系,转染包含如权利要求1所述VSVG突变体的质粒、慢病毒包装质粒表达Gag-Pol 的psPAX2、带有GFP的plenti-GFP,转染48h后,收取上清。
5.根据权利要求4所述的方法产生的慢病毒。
6.一种包含如权利要求1所述的VSVG突变体的慢病毒载体。
7.一种非治疗目的的将异源基因递送至靶细胞的方法,包括用根据权利要求4所述方法制备携带异源基因的慢病毒,感染所述靶细胞。
8.如权利要求7所述的方法,其中所述靶细胞选自293T、SupT1、THP1、PBMC、活化T细胞。
9.如权利要求7所述的方法,其中所述靶细胞选自传代和原代的肿瘤细胞、上皮细胞、成纤维细胞、肌细胞、神经细胞、干细胞。
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