[发明专利]类胶原融合蛋白组合物及制备方法

说明书

本发明涉及类胶原融合蛋白组合物，类胶原融合蛋白包括依次连接的结构单元，基础结构和活性单元，符合结构通式nRsubgt;1/subgt;‑Cgsubgt;1/subgt;‑mRsubgt;2/subgt;，其中，Rsubgt;1/subgt;为结构单元，Rsubgt;2/subgt;为活性单元，Cgsubgt;1/subgt;为为基础结构，m和n均为0‑5的自然数；其中，Rsubgt;1/subgt;和Rsubgt;2/subgt;均为弹性蛋白E和功能蛋白的组合物；这种类胶原融合蛋白能够用于医学美容材料，软骨重建材料，辐射防护材料或皮肤创面修复材料。本发明的有益效果是：类胶原融合蛋白序列中的弹性蛋白结构除了在生物学功能上可以发生网状交联形成稳定的力学结构以外，在融合蛋白的结构中可以起到柔性链接的作用，便于各个基本结构表现出独立的生物活性；增加类胶原融合蛋白的稳定性，也能够提高蛋白活性。

技术领域

本发明属于分子生物学及转化医学领域，尤其是涉及类胶原融合蛋白组合物。

背景技术

胶原蛋白是生物高分子，动物结缔组织中的主要成分，也是哺乳动物体内含量最多、分布最广的功能性蛋白，占蛋白质总量的25％～30％，某些生物体甚至高达80％以上。胶原蛋白种类较多，已至少发现了30余种胶原蛋白链的编码基因，可以形成16种以上的胶原蛋白分子，根据其结构，可以分为纤维胶原、基膜胶原、微纤维胶原、锚定胶原、六边网状胶原、非纤维胶原、跨膜胶原等。其中以Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原蛋白应用较为广泛。胶原蛋白在机体内的主要功能体现在维护细胞外环境，维持组织器官的正常生理功能、修复肌体损伤等方面。胶原蛋白无论是作为修复的生物支架材料、还是保护剂方面相对于其它高分子材料，具有较强的生物组织相容性，对细胞的支撑弹性和可降解性，因此，胶原蛋白可以广泛的应用在医药和化妆品等行业。

目前规模化使用的胶原蛋白主要是通过酸、碱或者酶法提取动物的皮肤或骨骼中的胶原蛋白，其主要来源为动物结缔组织，但从动物组织中提取的胶原蛋白存在动物源疾病等风险。伴随基因工程技术的大规模应用，基因工程重组表达胶原利用模式化表达宿主以外源蛋白表达的形式成功的解决了胶原蛋白大规模制备的瓶颈。如专利201210482543.2公布了一种II、III型胶原蛋白的融合性重组蛋白；西安巨子生物基因技术股份有限公司公布了重组人源型胶原蛋白的羟基化方法，对重组胶原蛋白进一步进行结构修饰，便于进一步提高产品的使用场景。江苏悦智生物医药有限公司公布的专利201910088754.X，涉及重组人源III型胶原蛋白a1链及其应用。纵观这些专利所涉及的胶原蛋白，均为单体式设计，未能考虑分析医学美容整形、软骨修复、辐射防护及慢性创面等方面，对不同类型胶原蛋白的需求。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供类胶原融合蛋白组合物。

本发明采用的技术方案是：类胶原融合蛋白组合物，类胶原融合蛋白包括依次连接的结构单元，基础结构和活性单元，符合式1结构通式；

nR₁-Cg₁-mR₂      式1；

其中，R₁为结构单元，R₂为活性单元，Cg₁为为基础结构，Cg₁为I型胶原蛋白的截短型蛋白序列，序列如SEQ No：1所示，m和n均为0-5的自然数。

优选地，R₁和R₂均为弹性蛋白E和功能蛋白的组合物；

E序列如SEQ No：4所示。

优选地，R₁为Cg₂-E或Cg₃-E；

Cg₂和Cg₃分别为II型胶原蛋白和III型胶原蛋白的截短型蛋白序列，Cg₂序列如SEQNo：2所示，Cg₃序列如SEQ No：3所示。