[发明专利]用于COVID-19、FluA、FluB病毒检测的冻干PCR试剂及其制备方法

权利要求书

1.用于COVID-19、FluA、FluB病毒检测的冻干PCR试剂，其特征在于：包括Taq DNA聚合酶1-20单位、逆转录酶20-200单位、尿嘧啶-DNA糖基化酶0.1-1单位、核糖核酸酶抑制剂1-40单位、上游引物1-20pmol、下游引物1-20pmol、TaqMan探针0.5-10pmol、dATP 2.5-100nmol、dCTP 2.5-100nmol、dGTP 2.5-100nmol、dUTP 2.5-100nmol、镁离子0.01-0.2μmol、Tris 0.25-2.5μmol、钾离子0.25-5μmol和m/v为2-15％冻干保护剂；

该冻干PCR试剂的制备步骤如下：

步骤S1：将上述试剂进行混合，混合均匀后，调节混合液pH值为8.3-8.9，制得PCR试剂；

步骤S2：将步骤S1制得的PCR试剂加入PCR管中，在不盖盖的条件下放入冻干机中，进行冻干反应后，在氮气环境下封装冻干PCR试剂；

步骤S3：将待测样品进行核酸提取，得到核酸溶液；

步骤S4：将步骤S2制得的冻干PCR试剂加入步骤S3制得的核酸溶液中，制得混合液；

步骤S5：将步骤S4制得的混合液进行PCR扩增。

2.根据权利要求1所述的用于COVID-19、FluA、FluB病毒检测的冻干PCR试剂，其特征在于：所述的Taq DNA聚合酶为5单位，逆转录酶为50单位，尿嘧啶-DNA糖基化酶为0.25单位，核糖核酸酶抑制剂为10单位，上游引物为5pmol，下游引物为5pmol，TaqMan探针为2.5pmol，dATP为5nmol，dCTP为5nmol，dGTP为5nmol，dUTP为10nmol，镁离子为0.05μmol，Tris为1.25μmol，钾离子为2.25μmol，冻干保护剂m/v为7.2％。

3.根据权利要求2所述的用于COVID-19、FluA、FluB病毒检测的冻干PCR试剂，其特征在于：所述的逆转录酶为AMV逆转录酶和M-Mulv逆转录酶中的一种或两种任意比例混合，上游引物为COVID-19、FluA、FluB病毒和人GAPDH基因的上游引物，下游引物为COVID-19、FluA、FluB病毒和人GAPDH基因的下游引物，TaqMan探针为COVID-19、FluA、FluB病毒和人GAPDH基因的TaqMan探针，冻干保护剂为海藻糖、蔗糖、葡萄糖、岩藻糖、山梨醇、甘露醇、右旋糖苷、聚乙二醇中的一种或多种任意比例的混合。