[发明专利]禽流感HA-Fd融合蛋白及其制备方法和疫苗

说明书

本发明提供了一种禽流感HA‑Fd融合蛋白及其制备方法和疫苗，涉及生物医药技术领域。该禽流感HA‑Fd融合蛋白由N端至C端依次含有禽流感HA片段和噬菌体Fibritin foldon片段；所述禽流感HA片段的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述噬菌体Fibritin foldon片段的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。该禽流感HA‑Fd融合蛋白具有三聚体的构象，蛋白结构接近天然蛋白。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，尤其是涉及一种禽流感HA-Fd融合蛋白及其制备方法和疫苗。

背景技术

高致病性禽流感(Highly pathogenic avian influenza，HPAI)是一种人畜共患的烈性传染病，该病由甲型流感病毒引起，禽类，尤其是鸡是该传染性疾病的主要传染源。1997年，中国香港首次报道了家禽和人感染高致病性禽流感H5N1，随后高致病性禽流感在世界广泛传播，引起超过500人的感染。高致病性禽流感死亡率高达60％，对人类公共卫生造成持续性威胁。

甲型流感病毒属于正粘病毒科，是具有包膜的单负链RNA病毒，其基因组包含8条独立的基因节段，总长度约13kb，可编码多达16个蛋白。根据病毒表面的血凝素蛋白(hemagglutinin，HA)和酸苷酶蛋白 (neuraminidase，NA)两个糖蛋白又分为不同亚型。这两种糖蛋白含有中和抗体所识别的关键抗原决定簇。HA蛋白是流感病毒最主要的表面抗原，是宿主免疫反应的主要靶点。HA基因是目前禽流感疫苗的重要组成部分，在病毒的复制过程中被切割为具有免疫原性的HA1亚基和保守的HA2亚基。HA1基因经确认长度为1032个核苷酸，编码345个氨基酸，预测蛋白分子量大小约为39.5kDa。NA蛋白负责将细胞表面糖蛋白或者糖脂末端的唾液酸剪切掉，从而使病毒能够从宿主细胞释放，进一步传播和扩散，NA蛋白也是流感病毒的一个表面抗原。到目前为止，共鉴定出16个HA亚型(H1-H16)和9个NA亚型(N1-N9)。目前HA作为主要活性成分的亚单位疫苗中的HA蛋白与天然的HA蛋白的构象具有较大的差异，因此免疫活性较差，不能有效使机体产生免疫反应。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种禽流感HA-Fd融合蛋白，该融合蛋白具有三聚体的构象，蛋白结构接近天然蛋白。

本发明的第二目的在于提供上述禽流感HA-Fd融合蛋白的制备方法，该制备方法具有稳定、高效和质量可控的优点。

本发明的第三目的在于提供一种禽流感疫苗，使用该疫苗免疫机体后，能够使机体产生良好的免疫反应。

为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种禽流感HA-Fd融合蛋白，所述禽流感HA-Fd融合蛋白由N端至C端依次含有禽流感HA片段和噬菌体Fibritin foldon片段；所述禽流感HA片段的氨基酸序列如SEQ ID NO.1 所示，所述噬菌体Fibritin foldon片段的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

根据本发明的另一个方面，本发明还提供了一种编码所述禽流感 HA-Fd融合蛋白的核酸。

根据本发明的另一个方面，本发明还提供了一种生物材料，所述生物材料表达所述禽流感HA-Fd融合蛋白和/或含有编码所述禽流感HA-Fd融合蛋白的基因；所述生物材料包括表达盒、载体、重组微生物或细胞系中的至少一种。

根据本发明的另一个方面，本发明还提供了一种所述禽流感HA-Fd融合蛋白的制备方法，包括在宿主中表达编码所述的禽流感HA-Fd融合蛋白的基因。

根据本发明的另一个方面，本发明还提供了一种疫苗，该疫苗包括所述禽流感HA-Fd融合蛋白，所述编码所述禽流感HA-Fd融合蛋白的核酸，或所述生物材料。