[发明专利]一种基于钒酸银/钒酸铟的电化学发光传感器制备方法及应用

权利要求书

1.一种基于钒酸银/钒酸铟纳米复合材料的电化学发光传感器制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）依次用1.0、0.3、0.05 μm的氧化铝粉末对玻碳电极进行抛光，在超纯水和乙醇中超声清洗，氮气吹干；

（2）在处理好的电极表面滴加6 μL、浓度为0.5~5 mg/mL的复合发光体作为传感基底材料，4 °C下晾干成膜；

（3）加入3~8 mM巯基乙酸在4 °C下浸泡5 h后转入EDC/NHS混合体系中浸泡30 min来活化羧基；

（4）继续在4 °C条件下浸泡浓度为5~15 μg/mL的原降钙素抗体1 h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液洗净电极表面，4°C下晾干；

（5）在质量浓度为1~3%的牛血清白蛋白中浸泡来封闭非特异性活性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，常温下晾干；

（6）滴加6 μL、浓度为0.0001~50 ng/mL的原降钙素抗原，在室温下孵化1 h后，用pH7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗电极表面，室温下晾干；

（7）继续滴加6 μL、浓度为2~4 mg/mL的氧化铜纳米球捕获抗体孵化液于电极表面，室温下孵化1 h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液缓慢冲洗电极表面，室温下晾干；

（8）传感器构建完毕，进行电致化学发光测试；

所述传感基底材料复合发光体的制备，包括以下步骤：

（1）钒酸银/钒酸铟复合纳米材料的制备

在60 mL去离子水中加入1.0 mmol的偏钒酸铵，在磁搅拌下得到均相溶液；

随后，1.0 mmol的硝酸银加入上述溶液中，并在磁力下搅拌20 min；

这种混合溶液的pH值使用质量浓度为28 %的一水合氨调整到8.0；

获得的混合物转移到一个100 mL的聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜中，保存在180 °C下12 h；

之后，生成的黄色沉积物被过滤收集，用去离子水清洗三次；

最终，在60 °C在真空干燥得到产品钒酸银；

紧接着，将100 mg钒酸银分散到70 mL去离子水中超声30 min，然后40 mg一水合硝酸铟加入并持续搅拌30 min获得均匀的混合物后转移到一个100 mL的聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜中， 在140 °C下保存8 h；

冷却后，离心收集的固体产品并在60 °C下真空干燥10 h获得钒酸银/钒酸铟复合材料；

（2）四苯乙烯纳米簇的制备

采用脱溶法，制备了四苯乙烯纳米簇；

将0.5 mg 四苯乙烯粉末溶解于0.5 mL四氢呋喃中，得到均匀无色的四苯乙烯溶液；

随后，用5 mL去离子水在室温下超声分散10 mg 牛血清白蛋白；

然后将0.5 mL 四苯乙烯在超声下缓慢注入牛血清白蛋白溶液中，室温搅拌2 h；

最后用水和无水乙醇洗涤后放入真空干燥箱中干燥得到四苯乙烯纳米簇粉末；

（3）复合发光体的制备

取2 mg钒酸银/钒酸铟复合纳米材料在1 M的巯基乙酸溶液中浸泡12 h后离心去除上清液并分散在1 mL水中，将步骤（2）中制备的四苯乙烯纳米簇溶于1 mL水中，混合两溶液，保持震荡8 h，离心洗涤，获得复合发光体材料的粉末。